翻譯后修飾蛋白組學分析:蛋白質組學的研究的工作不只聚焦于細胞不同生長時期或是疾病條件下的蛋白質表達水平變化,許多至關重要的生命進程不只由蛋白質相對豐度控制,更重要的是被時空特異分布的、可逆的翻譯后修飾所調控,因而揭示翻譯后修飾發生規律是解析蛋白質復雜多樣的生物...
蛋白質磷酸化修飾組學技術優點:1、全方面性:磷酸化蛋白質組學以整個細胞蛋白為研究對象,研究內容包括了細胞內具有生命功能的蛋白,如細胞增生、細胞分裂和細胞分化等相關蛋白,因而研究更為全方面。2、可靠性:傳統的生物學研究蛋白質磷酸化往往針對特定條件,以兩個蛋白或更...
定量蛋白質組學分析(QuantitativeProteomics)是對一個基因組表達的全部蛋白質或一個復雜混合體系內所有蛋白質進行精確鑒定和定量。可用于篩選和尋找任何因素引起的樣本之間的差異表達蛋白,結合生物信息學揭示細胞生理病理等功能,同時也可對某些關鍵蛋白...
蛋白質糖基化修飾組學技術:糖基化是在酶的控制下,蛋白質或脂質附加上糖類的過程,發生于內質網和高爾基體等部位。在糖基轉移酶作用下將糖轉移至蛋白質,和蛋白質上的氨基酸殘基共價結合。蛋白質經過糖基化作用,形成糖蛋白。糖基化是對蛋白的重要的修飾作用,有調節蛋白質功能作...
蛋白質組學在醫學的研究應用:蛋白質組學(Proteomics)是研究細胞、組織或生物體中蛋白質組成、定位、變化及其相互作用規律的科學,包括對蛋白質表達模式和蛋白質組功能模式的研究。蛋白質組學的發展對尋找疾病的診斷標志、篩選藥物靶點、毒理學研究等有重要意義,也因...
蛋白質糖基化修飾組學技術:糖基化是在酶的控制下,蛋白質或脂質附加上糖類的過程,發生于內質網和高爾基體等部位。在糖基轉移酶作用下將糖轉移至蛋白質,和蛋白質上的氨基酸殘基共價結合。蛋白質經過糖基化作用,形成糖蛋白。糖基化是對蛋白的重要的修飾作用,有調節蛋白質功能作...
定量蛋白質組學分析:特點:(1)不同樣本標記之后混樣,統一處理上機,減少了分別上機造成的實驗誤差,并利用同位素標簽的豐度來檢測,定量更準確,重復性更好;(2)由于需要標記試劑標記,因此成本相對較高;(3)通量高,在一次實驗中比較多可同時比較8個樣品;(4)利用...
PRM靶向定量蛋白質組學分析流程是怎樣的?要做PRM首先要明確目標蛋白(或多肽)是什么,設計和建立針對這些目標蛋白PRM質譜采集方法,然后對待測樣品進行PRM數據采集,將得到的原始譜圖數據導入分析軟件提取子離子信息進行定量。另外,如果配制已知濃度的標準肽段,用...
PRM靶向定量蛋白質組學分析流程是怎樣的?要做PRM首先要明確目標蛋白(或多肽)是什么,設計和建立針對這些目標蛋白PRM質譜采集方法,然后對待測樣品進行PRM數據采集,將得到的原始譜圖數據導入分析軟件提取子離子信息進行定量。另外,如果配制已知濃度的標準肽段,用...
GC-MS非靶向與代謝組學的關系?代謝組學是運用多種技術手段,研究生物體系中小分子代謝物(包括氨基酸、糖和磷酸糖、生物胺和脂質等)的種類、數量及變化規律的科學,是系統生物學的重要組成部分。其中GC-MS非靶向代謝組學是對生物體內源性代謝物進行系統全方面的分析平...
單細胞轉錄組學技術:單細胞轉錄組目前主要有三種方法:SMART擴增技術、10×genomics技術及Andeplete技術。SMART擴增技術比較關鍵的技術,就是設計了2個特殊的引物。再配合用MMLV逆轉錄酶進行逆轉錄。特殊引物1由中間PolyT序列加上一段通...
轉錄組學測序結果的影響因素?RNA的降解嚴重影響測序的質量,RNA降解后,加入poly-A后無法捕獲純化mRNA,因此,隨機引物反轉錄無法得到全部的cDNA,導致測序結果出現明顯的3‘-和5’-偏向。文庫中的poly-A多聚物的存在會對測序信號產生干擾,影響測...
代謝組學發展前景:較低的費用,是促使代謝組學在臨床上易于接受的另一個原因。與其他“組學”研究相比,代謝組學的費用更低,研究人員可以通過代謝組學研究篩檢出代謝產物,然后采用更昂貴的基因組學和蛋白質組學的方法對有意義的代謝產物進一步加以研究。首先,必須識別出代謝產...
質譜分析蛋白翻譯后修飾原理:相較于沒有發生翻譯后修飾的蛋白,翻譯后修飾蛋白會在特定肽段序列有分子量的增加。在蛋白翻譯后修飾方式的質譜分析過程中,蛋白會首先被酶切成肽段,然后進入質譜進行分析;通過質譜分析,得到的是一系列肽段的相對分子質量信息。對于某一個特定的肽...
轉錄組學應用領域:農林領域:生長發育機制,抗逆脅迫機制,育種,物種保護研究等;畜牧業:生長發育機制,致病機理研究,肉類及乳制品品質研究等;海洋水產:生長發育機制,漁業資源,漁業環境與水產品安全等;微生物:致病機理,耐藥機制,病原體-宿主相互作用研究等;生物醫藥...
蛋白翻譯后修飾檢測:由于PTMs在基礎生物學以及疾病發病機理中的重要性,因此非常需要對蛋白質的翻譯后修飾進行檢測。對蛋白翻譯后修飾進行研究時通常需要富集步驟,因為這些翻譯后修飾的蛋白質相對含量較低。大多數PTMs的檢測方法與富集策略結合在一起開發,以提供比較好...
代謝組學概念:基因與蛋白質的表達緊密相連,而代謝物則更多地反映了細胞所處的環境,這又與細胞的營養狀態,藥物和環境污染物的作用,以及其它外界因素的影響密切相關。因此有人認為,“基因組學和蛋白質組學告訴你什么可能會發生,而代謝組學則告訴你什么確實發生了。”代謝組學...
PRM靶向定量蛋白質組學分析流程是怎樣的?要做PRM首先要明確目標蛋白(或多肽)是什么,設計和建立針對這些目標蛋白PRM質譜采集方法,然后對待測樣品進行PRM數據采集,將得到的原始譜圖數據導入分析軟件提取子離子信息進行定量。另外,如果配制已知濃度的標準肽段,用...
蛋白質修飾位點分析:基于LC-MS/MS分析能夠精確測定蛋白質或多肽分子質量這一特性,從而檢測蛋白質或者多肽上位點發生何種修飾。可檢測修飾類型如下: 磷酸化、糖基化、乙酰化、泛素化、丙酰化、丁酰化、丙二酰化、戊二酰化、琥珀酰化、單甲基化、二甲基化、三甲基化。1...
蛋白質學組翻譯后修飾自下而上分析策略:常用的糖蛋白分離和富集技術有:a. 凝集素親和技術;b. 肼化學富集;c. 親水性相互作用色譜法;d. β-消除/邁克爾加成反應。基于質譜的糖蛋白鑒定和糖基化位點測定方法有:a. PNGase F酶法;b. Endo H酶...
轉錄組學:轉錄組學是研究特定的細胞、組織或個體在特定時間和狀態下所轉錄出所有RNA的學科,轉錄組測序是指利用高通量測序方法,研究特定的細胞、組織或個體在特定時間和狀態下所轉錄出的所有mRNA,用于揭示不同功能狀態下的基因表達、結構的差異,闡明分子機制。應用領域...
RNA-Seq轉錄組學技術優勢:RNA-seq技術可以檢測到低水平表達、未識別的轉錄子和新拼接亞型基因。另一方面,與基因芯片相比,RNA-Seq有一個更廣的檢測動態范圍,可以研究編碼和非編碼RNA,更易于基因網絡的構建、發現選擇性剪切轉錄物,檢測到等位基因的具...
代謝組學研究方法: 對于代謝產物來說,不只只有質譜峰這個特征。更進一步說,質譜(MS)并不能檢測出所有的代謝產物,并不是因為質譜的靈敏度不夠,而是由于質譜只能檢測離子化的物質,但有些代謝產物在質譜儀中不能被離子化。采用核磁共振(NMR)的方法,可以彌補色譜的不...
轉錄組學測序流程:1、樣品RNA準備。2、測序文庫構建。3、DNA成簇(Cluster)擴增。4、高通量測序(Illumina)。5、數據分析。轉錄組的分析大致有以下幾種情況:1、同一物種在發育過程中的各時間節點的基因表達特點及存在的差異;2、不同品系之間存在...
蛋白質組學,指對某一基因組所表達的所有蛋白質及其特征進行大規模、系統化地研究,以期望在蛋白質水平上解釋控制復雜的生命活動的分子網絡。研究的內容主要包括:組成蛋白質一級結構氨基酸的序列特征、蛋白質的豐度、蛋白質活性、蛋白質的修飾、亞細胞定位和三維結構、蛋白質之間...
代謝組學樣本收集注意事項:1.對于動物組織樣本無法滿足50mg/樣,如海馬組織,大腦組織等,可考慮同組混樣以達到50mg/樣的要求。2.對于含水量高的果實進行取樣很難保持高度均一性(如番茄的果皮、果肉等),建議將整個果實進行液氮研磨后凍干混勻,對混勻后的粉末進...
蛋白組學樣本寄送前是否需要精確計數或是稱量?不同樣本寄送會有不同的送樣要求,按照收集方法提供可以保證實驗用量充足。不需要精確計數或是稱量,項目開展前會進行蛋白濃度的測定,后續也是不同樣本等蛋白量處理、上機檢測,但是要保證每個樣本的寄樣量達到實驗要求。常規定量蛋...
全轉錄組測序為什么需要構建兩個文庫?全轉錄組測序需要構建2個測序文庫,一個小RNA文庫和一個去除核糖體RNA的鏈特異性文庫,然后分別上機測序。小RNA長度較短,一般小于50nt,采用測序策略為50SE。其他三類RNA序列一般大于200,通常在1000以上,可達...
GC-MS非靶向與代謝組學的關系?代謝組學是運用多種技術手段,研究生物體系中小分子代謝物(包括氨基酸、糖和磷酸糖、生物胺和脂質等)的種類、數量及變化規律的科學,是系統生物學的重要組成部分。其中GC-MS非靶向代謝組學是對生物體內源性代謝物進行系統全方面的分析平...
代謝組學樣本收集指南:1.血漿樣本收集:(1)從合適的靜脈采集血液(典型10mL)到標記的肝素鋰血漿收集管中(肝素鋰用作抗凝劑)。(2)立即于4 °C離心(3000g)20min,上清液即為血漿。(3)離心完畢,取出血漿收集管,取上清液(血漿),分等份(0.5...