圖3. 用于轉染的Invivofectamine 3.0試劑及RNAi復合物非常容易獲得:只需簡單地混合,并進行孵育(30min)、稀釋、及注射即可。 高效、靶向敲低 在實驗靶標中可觀察到高達85%的敲低效果 圖4. 使用Invivofectamine 3.0試劑可在單次靜脈注射后即可在肝臟中實現靶向敲低。Invivofectamine 3.0試劑與靶向Factor VII (FVII)或PPIB mRNA的siRNA組成的復合物,以每千克小鼠體重1 mg(mg/kg)的注射量進行注射,**終靶向mRNA水平出現了高達85%的敲低(使用Ta...
胞因素用低代數的細胞293T細胞非常重要!!當然也要保證細胞狀態特別好,沒有細微污染,鋪板均勻。飽滿狀態好的細胞才可以產生較高滴度的***哦!載體系統在實驗中**常見的慢***載體系統有三質粒系統、四質粒系統,當然使用三質粒系統的小伙伴居多,一定要選擇成熟商業化的載體系統!載體構建和質粒抽提純化我們要注意是否構建時導致質粒載體重組或某個部件缺失,或污染別的質粒、雜物?中抽純化是否污染?要養成同時做陰性對照的習慣:建議目的基因載體和陰性對照GFP載體是同一批,且建議每次包裝都如此操作,要保證目的基因的表達載體構建純化良好,質粒間比例得當,并且對質粒進行酶切驗證。轉染產品知多少——siRNA轉染試...
圖5.Invivofectamine3.0試劑與靶向FVII的siRNA在單次靜脈注射后可在肝臟中引起劑量反應的敲低現象。Invivofectamine3.0試劑與靶向FVII的AmbioninvivosiRNA以0.02到2mg/kg的劑量進行注射。隨后分離血清并檢測FVII蛋白的水平(Biophen顯色檢測)。持續敲低能力在單次注射后可觀察到更長的敲低時間圖6.使用三種不同濃度的靶向FactorVII(FVII)的siRNA研究劑量效應。siRNA分子與Invivofectamine3.0試劑形成復合物后分別以1、0.5、及0.25mg/kg的劑量進行注射。在第2、5、9、16、23及30...
十全十美難,十全九美卻可以通過選擇一款好的轉染試劑來實現。理想的轉染試劑包括要具有較高的轉染效率,細胞毒性低,操作簡單可重復,價格還要可愛。現在大多數實驗室用的是脂質體系列轉染試劑,但脂質體對細胞毒性大,某些細胞的轉染效率還很低,看單孔的價格也很不美好。尤其是在轉染RNA方面,脂質體的劣勢較明顯。QIAGEN在轉染試劑領域的研發思路與其核酸純化領域的精而專,全而深不同。在轉染試劑的研發過程中,另辟蹊徑,研精致思進而做到小而美的轉染產品。從市面上眾多轉染試劑的一片紅海中,神奇的開辟出一塊藍海,為客戶烹制出了幾款高效、快速、低毒又親民的轉染試劑私房菜。一般會同時設置對照,對RNAi結果進行比較。R...
LipoFectMax?轉染試劑 LipoFectMax?轉染試劑具有以下幾個優點:高轉染效率,適用于多種細胞系對細胞毒性低適用于DNA和RNA的轉染轉染前無需去除細胞培養基或血清轉染后無需清洗細胞或更換培養基 1轉染效率高,適用于多種細胞系圖1. LipoFectMax?轉染試劑以綠色熒光蛋白(GFP)表達質粒轉染幾種常見細胞系,通過檢測GFP信號比較轉染效率。 2細胞毒性低圖2.LipoFectMax? ,LipoFectamine?2000及LipoFectamine?3000分別對A549細胞進行轉染操作,通過計算轉染后的細胞存活率比較細胞毒性。 用于基因編輯的RNP轉...
.在多種不同類型細胞中基因敲除效率超過90%。 高靈活應用, 同一試劑可用于siRNA和質粒共轉染的基因沉默實驗。 細胞毒性低,結果相關性好,確保所觀察到的細胞效應是由轉染的siRNA而非轉染過程本身介導。 兼容含血清或不含血清的培養基,轉染前后均無需換液(如無血清培養基)。 X-tremeGENE siRNA Transfection Reagent用于4種細胞系的HPRT基因沉默實驗。根據各試劑說明書建議的操作流程,或標準實驗方法,將100nM HPRT特異性siRNA轉染至4種細胞,通過LightCycler? h-HPRT Housekeeping Gene...
胞因素用低代數的細胞293T細胞非常重要!!當然也要保證細胞狀態特別好,沒有細微污染,鋪板均勻。飽滿狀態好的細胞才可以產生較高滴度的***哦! 載體系統在實驗中**常見的慢***載體系統有三質粒系統、四質粒系統,當然使用三質粒系統的小伙伴居多,一定要選擇成熟商業化的載體系統!載體構建和質粒抽提純化我們要注意是否構建時導致質粒載體重組或某個部件缺失,或污染別的質粒、雜物?中抽純化是否污染?要養成同時做陰性對照的習慣:建議目的基因載體和陰性對照GFP 載體是同一批,且建議每次包裝都如此操作,要保證目的基因的表達載體構建純化良好,質粒間比例得當,并且對質粒進行酶切驗證. 所見即所得——分享...
細胞轉染實驗是生物醫學實驗室中**常規的研究手段,目的是把外源基因、蛋白或者小分子導入到靶細胞內。目前主要有三種主流方法:生物轉染,物理轉染和化學轉染。其中生物轉染主要是利用***等微生物作為基因導入載體,以慢***、腺***和腺相關***等**常見,其侵染效率可以達到90%以上,但常因安全性等問題,很多實驗室對其敬而遠之。物理轉染主要包括顯微注射、電穿孔和基因***,無論哪一種都需要特定的設備,且一分錢一分貨,性能好的價格也都很性感電轉化化學轉染方法是生物醫學研究中**常用的轉染方法,主要包括兩類:陽離子脂質體和陽離子聚合物。其基本原理是利用陽離子的化學分子與帶有負電荷的核酸通過正負電荷作用...
.在多種不同類型細胞中基因敲除效率超過90%。 2.高靈活應用, 同一試劑可用于siRNA和質粒共轉染的基因沉默實驗。 3.細胞毒性低,結果相關性好,確保所觀察到的細胞效應是由轉染的siRNA而非轉染過程本身介導。 4.兼容含血清或不含血清的培養基,轉染前后均無需換液(如無血清培養基)。 圖4. X-tremeGENE siRNA Transfection Reagent用于4種細胞系的HPRT基因沉默實驗。根據各試劑說明書建議的操作流程,或標準實驗方法,將100nM HPRT特異性siRNA轉染至4種細胞。 通過LightCycler? h-HPRT Housek...
細胞轉染過程X-tremeGENE9DNA轉染試劑簡介:X-tremeGENE9DNA轉染試劑是脂質和其它成分混合而得的一類多組份試劑,溶于80%乙醇中,經0.2μm濾膜過濾,然后封裝于玻璃小瓶中,適用于細胞分析的多種實驗。優勢:1.具有細胞毒性極低、轉染后細胞存活率高,生成可信任的生理學相關數據。2.操作簡便、節省時間,只需對X-tremeGENE9DNA轉染試劑進行簡單稀釋,再與質粒DNA共同孵育,即可直接向細胞添加反應混合物(有無血清均可)。3.對于常用細胞無需進行費時費力的優化工作.轉染試劑實現了更高的有效***細胞/未轉染細胞比率,超過其他RNAi試劑。上海病毒轉染試劑多少錢胞因素用...
基于磷酸鈣成分的轉染試劑,其主要作用原理是與DNA通過沉淀反應形成磷酸鈣-DNA復合物,粘附到細胞膜表面,借助內吞作用進入細胞質。pH值,鈣離子濃度,DNA濃度,沉淀時間,細胞孵育時間乃至各組分加入順序都可能對結果產生影響,因此實驗條件摸索和優化時間較長,且重復性不佳。基于脂質體的轉染試劑包括中性脂質體和陽離子脂質體兩種。中性脂質體是利用脂質膜包裹DNA,借助脂質膜將DNA導入細胞膜內。目前應用比較***的是帶正電的陽離子脂質體轉染試劑,DNA并沒有預先包埋在脂質體中,而是帶負電的DNA自動結合到帶正電的脂質體上,形成DNA-陽離子脂質體復合物,從而吸附到帶負電的細胞膜表面,經過內吞被導入細胞...
X-tremeGENE9DNA轉染試劑簡介:X-tremeGENE9DNA轉染試劑是脂質和其它成分混合而得的一類多組份試劑,溶于80%乙醇中,經0.2μm濾膜過濾,然后封裝于玻璃小瓶中,適用于細胞分析的多種實驗。優勢:1.具有細胞毒性極低、轉染后細胞存活率高,生成可信任的生理學相關數據。2.操作簡便、節省時間,只需對X-tremeGENE9DNA轉染試劑進行簡單稀釋,再與質粒DNA共同孵育,即可直接向細胞添加反應混合物(有無血清均可)。3.對于常用細胞無需進行費時費力的優化工作.pei轉染試劑說明書主要內容是什么?DNA轉染試劑對照美國Polysciences公司是一家成立于1961年,致力于...
簡介:X-tremeGENEHPDNA轉染試劑是一種高效的無動物源成分的低毒轉染試劑,兼容含血清或不含血清的培養基,可用于轉染各類真核細胞(包括昆蟲細胞)以及多種難轉染細胞系。優勢:1.簡單易用的多組分混合試劑,無動物源性成分,室溫穩定。2.高轉染效率,對于原代細胞和使用其它試劑難轉染的**細胞系有高轉染效率。3.使用細胞毒性低的試劑,結果相關性好。圖2.X-tremeGENEHP高效低毒的轉染性能。通過X-tremeGENEHP和脂質體轉染方法將GFP表達質粒轉染至CHO-K1。A和C圖的熒光視野顯示了實驗后兩種方法均獲得了成功轉染的細胞。但B和D圖的明亮視野表明脂質體轉染方法的細胞毒性遠高...
原代細胞直接分離自組織并在適當條件下增殖,因此,它們的形態學和生理特征和體內狀態更為相似。但相對于連續細胞系,它們通常更難培養和轉染。在經過***次傳代培養之后,原代培養物變成了一種細胞系。源自于原代培養物的細胞系具有有限的壽命(即它們是有限細胞系),且隨著傳代的進行,具有比較高的生長能力的細胞逐漸占據支配地位,從而造成了細胞群內的基因型和表型接近一致的情形。相對來說,這一類細胞要比原代細胞使用起來更為方便,尤其是穩定轉染的克隆傳代。我們希望把mRNA轉染進入原代細胞,那**適合的轉染產品就是Lipofectamine MessengerMAX?或是Neon電轉儀。質粒轉染試劑報價圖5.Inv...
LNCap細胞的培養和傳代嚴格由ATCC建議的操作步驟進行,與pBabe-hygro-SSeCKs(1.5ug)和pEGFP-N3(1:1,共1.0微克)共轉染(6孔板中每孔的量),并用LipoD293?試劑(左圖)和FugeneHD(右圖)分別按照生產制造商的科學實驗步驟進行轉染。轉染24小時后,用尼康Eclipse2000熒光顯微鏡檢測GFP熒光,以此來評價轉染效率。在血清和***的存在下,HepG2和SaoS-2細胞用pEGFP-N3和pSV-β-半乳糖苷酶DNAs分別轉染達到95%的細胞融合。轉染48小時后,分別通過Zeiss510激光共聚焦顯微鏡和β-半乳糖苷酶染色試劑盒檢測效率。轉...
原代細胞直接分離自組織并在適當條件下增殖,因此,它們的形態學和生理特征和體內狀態更為相似。但相對于連續細胞系,它們通常更難培養和轉染。在經過***次傳代培養之后,原代培養物變成了一種細胞系。源自于原代培養物的細胞系具有有限的壽命(即它們是有限細胞系),且隨著傳代的進行,具有比較高的生長能力的細胞逐漸占據支配地位,從而造成了細胞群內的基因型和表型接近一致的情形。相對來說,這一類細胞要比原代細胞使用起來更為方便,尤其是穩定轉染的克隆傳代。臨床級******毒載體生產必備轉染試劑..神經細胞轉染試劑選購細胞轉染實驗是生物醫學實驗室中**常規的研究手段,目的是把外源基因、蛋白或者小分子導入到靶細胞內。...
圖2.采用LipofectamineRNAiMAX轉染試劑轉染A549細胞時,實現了比較好的基因***效果和比較低的細胞毒性。試驗采用的LipofectamineRNAiMAX試劑劑量范圍為0.1μL-1.0μL之間,在維持優良的細胞活力的同時,實現了p53基因表達水平的有效敲低.功能多樣簡便的實驗方案,易于針對***的細胞系進行優化Invivofectamine?3.0Reagent突破性的體內轉染試劑Invivofectamine3.0試劑是一種突破性的體內RNAi輸送試劑,可大幅改善實驗性能,使用微克級的siRNA即可達到高達85%的敲低效果。轉染后6h觀察細胞狀態,并更換培養基,繼續培...
對 HepG2 細胞轉染效率的比較 右圖:使用以上轉染試劑將 GFP 的 cDNA(pEGFP-N3)按照生產商的提供的轉染步驟轉染到 HepG2 細胞(在膠原預處理的培養皿中培養)。在轉染 48 小時之后,用流式細胞儀檢測 GFP 陽性細胞(%)和熒光強度。 左圖:血清和***存在的條件下能提高 LipoD293 試劑(升級版)對在 HepG2 細胞的轉染效率。通過三種不同的條件下轉染 HepG2 細胞(生長在膠原處理的培養皿上)---無血清和***,10% 血清和***的存在,轉染 5 小時后換液和不換液。 每孔培養體積均為100μL,細胞數目在105左右。上海昆蟲細胞...
原代細胞直接分離自組織并在適當條件下增殖。因此,它們的形態學和生理特征和體內狀態更為相似。但相對于連續細胞系,它們通常更難培養和轉染。在經過***次傳代培養之后,原代培養物變成了一種細胞系。源自于原代培養物的細胞系具有有限的壽命(即它們是有限細胞系),且隨著傳代的進行,具有比較高的生長能力的細胞逐漸占據支配地位,從而造成了細胞群內的基因型和表型接近一致的情形。相對來說,這一類細胞要比原代細胞使用起來更為方便,尤其是穩定轉染的克隆傳代。 RNAiMAX轉染試劑是先進、高效的siRNA輸送解決方案。動物轉染試劑原理基于磷酸鈣成分的轉染試劑,其主要作用原理是與DNA通過沉淀反應形成磷酸鈣-DNA...
細胞轉染過程:X-tremeGENE 9 DNA 轉染試劑 簡介: X-tremeGENE 9 DNA轉染試劑是脂質和其它成分混合而得的一類多組份試劑,溶于80%乙醇中,經0.2 μm濾膜過濾,然后封裝于玻璃小瓶中,適用于細胞分析的多種實驗。 優勢:1.具有細胞毒性極低、轉染后細胞存活率高,生成可信任的生理學相關數據。 2.操作簡便、節省時間,只需對X-tremeGENE 9 DNA轉染試劑進行簡單稀釋,再與質粒DNA共同孵育,即可直接向細胞添加反應混合物(有無血清均可)。 3.對于常用細胞無需進行費時費力的優化工作。 帶你了解性價比比較高的轉染試劑-PEI轉染...
Polysciences的高純度單體和聚合物產品在醫療器械中有許多應用,并不斷開發和增強其性能。公司秉承為應用而研發,目前已擁有超過3000種產品。質量保證1、遵循ISO 13485質量管理認證 獲得美國FDA有效注冊 遵守良好生產規范(cGMP) 獲得管理系統CSMS認證 特種化學行業公認的代言人功能強大、經濟實惠、安全可靠 這么好的轉染試劑,難道你不心動嗎? 華雅思創生物經營品牌 經過幾年的不懈努力,華雅思創生物提供的產品覆蓋免疫細胞***、干細胞***、干細胞基礎研究、動物模型疾病研究、基因檢測(NGS)、試管嬰兒、產品質控等諸多熱點科學研究...
細胞轉染過程X-tremeGENE9DNA轉染試劑簡介:X-tremeGENE9DNA轉染試劑是脂質和其它成分混合而得的一類多組份試劑,溶于80%乙醇中,經0.2μm濾膜過濾,然后封裝于玻璃小瓶中,適用于細胞分析的多種實驗。優勢:1.具有細胞毒性極低、轉染后細胞存活率高,生成可信任的生理學相關數據。2.操作簡便、節省時間,只需對X-tremeGENE9DNA轉染試劑進行簡單稀釋,再與質粒DNA共同孵育,即可直接向細胞添加反應混合物(有無血清均可)。3.對于常用細胞無需進行費時費力的優化工作。隨后分離血清并檢測FVII蛋白的水平(Biophen 顯色檢測)。上海懸浮細胞轉染試劑供應商 原代細胞...
胞因素用低代數的細胞293T細胞非常重要!!當然也要保證細胞狀態特別好,沒有細微污染,鋪板均勻。飽滿狀態好的細胞才可以產生較高滴度的***哦! 載體系統在實驗中**常見的慢***載體系統有三質粒系統、四質粒系統,當然使用三質粒系統的小伙伴居多,一定要選擇成熟商業化的載體系統!載體構建和質粒抽提純化我們要注意是否構建時導致質粒載體重組或某個部件缺失,或污染別的質粒、雜物?中抽純化是否污染?要養成同時做陰性對照的習慣:建議目的基因載體和陰性對照GFP 載體是同一批,且建議每次包裝都如此操作,要保證目的基因的表達載體構建純化良好,質粒間比例得當,并且對質粒進行酶切驗證. 并更換培養基,繼續...
X-tremeGENE9DNA轉染試劑簡介:X-tremeGENE9DNA轉染試劑是脂質和其它成分混合而得的一類多組份試劑,溶于80%乙醇中,經0.2μm濾膜過濾,然后封裝于玻璃小瓶中,適用于細胞分析的多種實驗。優勢:1.具有細胞毒性極低、轉染后細胞存活率高,生成可信任的生理學相關數據。2.操作簡便、節省時間,只需對X-tremeGENE9DNA轉染試劑進行簡單稀釋,再與質粒DNA共同孵育,即可直接向細胞添加反應混合物(有無血清均可)。3.對于常用細胞無需進行費時費力的優化工作.包括**常見的DNA,用于基因編輯的siRNA,能夠更快表達蛋白的mRNA,CRISPR-Cas9甚至是體內轉染。基...
LNCap細胞的培養和傳代嚴格由ATCC建議的操作步驟進行,與pBabe-hygro-SSeCKs(1.5ug)和pEGFP-N3(1:1,共1.0微克)共轉染(6孔板中每孔的量),并用LipoD293?試劑(左圖)和FugeneHD(右圖)分別按照生產制造商的科學實驗步驟進行轉染。轉染24小時后,用尼康Eclipse2000熒光顯微鏡檢測GFP熒光,以此來評價轉染效率。在血清和***的存在下,HepG2和SaoS-2細胞用pEGFP-N3和pSV-β-半乳糖苷酶DNAs分別轉染達到95%的細胞融合。轉染48小時后,分別通過Zeiss510激光共聚焦顯微鏡和β-半乳糖苷酶染色試劑盒檢測效率。....
簡介: X-tremeGENE HP DNA轉染試劑是一種高效的無動物源成分的低毒轉染試劑,兼容含血清或不含血清的培養基,可用于轉染各類真核細胞(包括昆蟲細胞)以及多種難轉染細胞系。 優勢: 1.簡單易用的多組分混合試劑,無動物源性成分,室溫穩定。 2.高轉染效率,對于原代細胞和使用其它試劑難轉染的**細胞系有高轉染效率。 3.使用細胞毒性低的試劑,結果相關性好. 圖2. X-tremeGENE HP高效低毒的轉染性能。通過X-tremeGENE HP和脂質體轉染方法將GFP表達質粒轉染至CHO-K1。A和C圖的熒光視野顯示了實驗后兩種方法均獲得了成功轉...
Polysciences的高純度單體和聚合物產品在醫療器械中有許多應用,并不斷開發和增強其性能。公司秉承為應用而研發,目前已擁有超過3000種產品。質量保證1、遵循ISO 13485質量管理認證 獲得美國FDA有效注冊 遵守良好生產規范(cGMP) 獲得管理系統CSMS認證 特種化學行業公認的代言人功能強大、經濟實惠、安全可靠 這么好的轉染試劑,難道你不心動嗎? 華雅思創生物經營品牌 經過幾年的不懈努力,華雅思創生物提供的產品覆蓋免疫細胞***、干細胞***、干細胞基礎研究、動物模型疾病研究、基因檢測(NGS)、試管嬰兒、產品質控等諸多熱點科學研究...