LipoFectMax?轉染試劑LipoFectMax?轉染試劑具有以下幾個優點:高轉染效率,適用于多種細胞系對細胞毒性低適用于DNA和RNA的轉染轉染前無需去除細胞培養基或血清轉染后無需清洗細胞或更換培養基1轉染效率高,適用于多種細胞系圖1.LipoFectMax?轉染試劑以綠色熒光蛋白(GFP)表達質粒轉染幾種常見細胞系,通過檢測GFP信號比較轉染效率。2細胞毒性低圖2.LipoFectMax?,LipoFectamine?2000及LipoFectamine?3000分別對A549細胞進行轉染操作,通過計算轉染后的細胞存活率比較細胞毒性。原代細胞直接分離自組織并在適當條件下增殖.上海真核...
原代細胞直接分離自組織并在適當條件下增殖,因此,它們的形態學和生理特征和體內狀態更為相似。但相對于連續細胞系,它們通常更難培養和轉染。在經過***次傳代培養之后,原代培養物變成了一種細胞系。源自于原代培養物的細胞系具有有限的壽命(即它們是有限細胞系),且隨著傳代的進行,具有比較高的生長能力的細胞逐漸占據支配地位,從而造成了細胞群內的基因型和表型接近一致的情形。相對來說,這一類細胞要比原代細胞使用起來更為方便,尤其是穩定轉染的克隆傳代。試劑可在單次靜脈注射后即可在肝臟中實現靶向敲低。蛋白轉染試劑哪種好羅氏X-TremeGENE便是新一代轉染試劑的佼佼者,升級版的多組分混合試劑,兼具極高轉染效率和...
LipoFectMax?轉染試劑LipoFectMax?轉染試劑具有以下幾個優點:高轉染效率,適用于多種細胞系對細胞毒性低適用于DNA和RNA的轉染轉染前無需去除細胞培養基或血清轉染后無需清洗細胞或更換培養基轉染效率高,適用于多種細胞系圖1.LipoFectMax?轉染試劑以綠色熒光蛋白(GFP)表達質粒轉染幾種常見細胞系,通過檢測GFP信號比較轉染效率。細胞毒性低圖2.LipoFectMax?,LipoFectamine?2000及LipoFectamine?3000分別對A549細胞進行轉染操作,通過計算轉染后的細胞存活率比較細胞毒性。MagTransf 磁轉染試劑實現高效轉染解析.sir...
圖2.采用LipofectamineRNAiMAX轉染試劑轉染A549細胞時,實現了比較好的基因***效果和比較低的細胞毒性。試驗采用的LipofectamineRNAiMAX試劑劑量范圍為0.1μL-1.0μL之間,在維持優良的細胞活力的同時,實現了p53基因表達水平的有效敲低.功能多樣簡便的實驗方案,易于針對***的細胞系進行優化Invivofectamine?3.0Reagent突破性的體內轉染試劑Invivofectamine3.0試劑是一種突破性的體內RNAi輸送試劑,可大幅改善實驗性能,使用微克級的siRNA即可達到高達85%的敲低效果。質粒細胞轉染步驟是什么?上海Opti-MEM...
確定希望輸送的運載物(如DNA、RNA或蛋白質)根據不同實驗類型,我們可能需要將不同的運載物輸送到細胞內部,包括**常見的DNA,用于基因編輯的siRNA,能夠更快表達蛋白的mRNA,CRISPR-Cas9甚至是體內轉染。正確的了解您希望輸送的運載物是選擇可靠轉染產品的第一步。2希望轉染的細胞類型轉染的細胞類型可簡單分為兩大類,連續細胞系和原代細胞。連續細胞系具有無限增殖的潛能,通常要比原代或有限細胞更易處理。但由于此類細胞經歷過基因改變而變得具有無限增殖能力,它們在培養過程中的表現可能無法必然地反映體內狀態。各種轉染試劑成分分析.電轉染試劑配制圖2.采用LipofectamineRNAiMA...
細胞轉染過程:X-tremeGENE9DNA轉染試劑簡介:X-tremeGENE9DNA轉染試劑是脂質和其它成分混合而得的一類多組份試劑,溶于80%乙醇中,經0.2μm濾膜過濾,然后封裝于玻璃小瓶中,適用于細胞分析的多種實驗。優勢:1.具有細胞毒性極低、轉染后細胞存活率高,生成可信任的生理學相關數據。2.操作簡便、節省時間,只需對X-tremeGENE9DNA轉染試劑進行簡單稀釋,再與質粒DNA共同孵育,即可直接向細胞添加反應混合物(有無血清均可)。3.對于常用細胞無需進行費時費力連續細胞系具有無限增殖的潛能,通常要比原代或有限細胞更易處理。國產轉染試劑原理將膠質瘤干細胞(3105)接種至6孔...
細胞轉染實驗是生物醫學實驗室中**常規的研究手段,目的是把外源基因、蛋白或者小分子導入到靶細胞內。目前主要有三種主流方法:生物轉染,物理轉染和化學轉染。其中生物轉染主要是利用***等微生物作為基因導入載體,以慢***、腺***和腺相關***等**常見,其侵染效率可以達到90%以上,但常因安全性等問題,很多實驗室對其敬而遠之。物理轉染主要包括顯微注射、電穿孔和基因***,無論哪一種都需要特定的設備,且一分錢一分貨,性能好的價格也都很性感電轉化化學轉染方法是生物醫學研究中**常用的轉染方法,主要包括兩類:陽離子脂質體和陽離子聚合物。其基本原理是利用陽離子的化學分子與帶有負電荷的核酸通過正負電荷作用...
簡介:X-tremeGENEHPDNA轉染試劑是一種高效的無動物源成分的低毒轉染試劑,兼容含血清或不含血清的培養基,可用于轉染各類真核細胞(包括昆蟲細胞)以及多種難轉染細胞系。優勢:1.簡單易用的多組分混合試劑,無動物源性成分,室溫穩定。2.高轉染效率,對于原代細胞和使用其它試劑難轉染的**細胞系有高轉染效率。3.使用細胞毒性低的試劑,結果相關性好。圖2.X-tremeGENEHP高效低毒的轉染性能。通過X-tremeGENEHP和脂質體轉染方法將GFP表達質粒轉染至CHO-K1。A和C圖的熒光視野顯示了實驗后兩種方法均獲得了成功轉染的細胞。但B和D圖的明亮視野表明脂質體轉染方法的細胞毒性遠高...
在多種不同類型細胞中基因敲除效率超過90%。2.高靈活應用,同一試劑可用于siRNA和質粒共轉染的基因沉默實驗。3.細胞毒性低,結果相關性好,確保所觀察到的細胞效應是由轉染的siRNA而非轉染過程本身介導。4.兼容含血清或不含血清的培養基,轉染前后均無需換液(如無血清培養基)。圖4.X-tremeGENEsiRNATransfectionReagent用于4種細胞系的HPRT基因沉默實驗。根據各試劑說明書建議的操作流程,或標準實驗方法,將100nMHPRT特異性siRNA轉染至4種細胞。通過LightCycler?h-HPRTHousekeepingGeneSet的熒光定量法評估基因沉默效率。...
胞因素用低代數的細胞293T細胞非常重要!!當然也要保證細胞狀態特別好,沒有細微污染,鋪板均勻。飽滿狀態好的細胞才可以產生較高滴度的***哦!載體系統在實驗中**常見的慢***載體系統有三質粒系統、四質粒系統,當然使用三質粒系統的小伙伴居多,一定要選擇成熟商業化的載體系統!載體構建和質粒抽提純化我們要注意是否構建時導致質粒載體重組或某個部件缺失,或污染別的質粒、雜物?中抽純化是否污染?要養成同時做陰性對照的習慣:建議目的基因載體和陰性對照GFP載體是同一批,且建議每次包裝都如此操作,要保證目的基因的表達載體構建純化良好,質粒間比例得當,并且對質粒進行酶切驗證.用于基因編輯的RNP轉染試劑.上海...
LipoFectMax?轉染試劑LipoFectMax?轉染試劑具有以下幾個優點:高轉染效率,適用于多種細胞系對細胞毒性低適用于DNA和RNA的轉染轉染前無需去除細胞培養基或血清轉染后無需清洗細胞或更換培養基轉染效率高,適用于多種細胞系圖1.LipoFectMax?轉染試劑以綠色熒光蛋白(GFP)表達質粒轉染幾種常見細胞系,通過檢測GFP信號比較轉染效率。細胞毒性低圖2.LipoFectMax?,LipoFectamine?2000及LipoFectamine?3000分別對A549細胞進行轉染操作,通過計算轉染后的細胞存活率比較細胞毒性。轉染產品知多少:轉染試劑選擇工具.上海懸浮細胞轉染試劑...
圖2.采用LipofectamineRNAiMAX轉染試劑轉染A549細胞時,實現了比較好的基因***效果和比較低的細胞毒性。試驗采用的LipofectamineRNAiMAX試劑劑量范圍為0.1μL-1.0μL之間,在維持優良的細胞活力的同時,實現了p53基因表達水平的有效敲低.功能多樣簡便的實驗方案,易于針對***的細胞系進行優化Invivofectamine?3.0Reagent突破性的體內轉染試劑Invivofectamine3.0試劑是一種突破性的體內RNAi輸送試劑,可大幅改善實驗性能,使用微克級的siRNA即可達到高達85%的敲低效果。轉染試劑實現了更高的有效***細胞/未轉染細...
美國Polysciences公司是一家成立于1961年,致力于特殊技精細化學試劑、實驗室產品,單/多聚體等產品的研發供應,所提供的產品服務于組織學(顯微技術)、生物技術、電子技術、護理及制藥工程等多個領域。起初為電子顯微鏡提供納米級樣本制備方案,幫助科學家揭示未知領域。隨后,開拓了在病理(組織研究)應用產品,使組織除了石蠟包埋外,還能夠包埋在塑料塊中;開發染料和染色劑,以實現更好的樣品觀測方式。與****合作,開發了用于診斷試劑盒應的聚合物微球。與美國國家**中心合作,開發天然產物分離和純化產品,并用于紫杉醇的初步臨床試驗。繼而開發出超順磁珠,用于DNA、蛋白質和肽的研究。但相對于連續細胞系,...
用LipoD293?體外DNA轉染試劑(Ver.II)(上圖)和受歡迎的品牌產品Invitrogen公司的293fectin?(下圖)轉染pEGFP-C1質粒到HEK293細胞中。轉染24小時后,細胞的尼康Eclipse熒光顯微鏡DIC成像圖(左側)和熒光成像圖(右側)。對懸浮HEK293F產生蛋白質效率的比較/30毫升的293F細胞分別使用LipoD293?試劑、293fectin、Xfect和Fugene6等轉染試劑按照生產商的標準轉染步驟將pEGFP-6xHis質粒導入細胞表達,用量為LipoD293?試劑,20微克,所有其他三種轉染試劑均使用30微克質粒DNA。轉染產品知多少——siR...
用LipoD293?體外DNA轉染試劑(Ver.II)(上圖)和受歡迎的品牌產品Invitrogen公司的293fectin?(下圖)轉染pEGFP-C1質粒到HEK293細胞中。轉染24小時后,細胞的尼康Eclipse熒光顯微鏡DIC成像圖(左側)和熒光成像圖(右側)。對懸浮HEK293F產生蛋白質效率的比較/30毫升的293F細胞分別使用LipoD293?試劑、293fectin、Xfect和Fugene6等轉染試劑按照生產商的標準轉染步驟將pEGFP-6xHis質粒導入細胞表達,用量為LipoD293?試劑,20微克,所有其他三種轉染試劑均使用30微克質粒DNA。正確的了解您希望輸送的運...
Polysciences的高純度單體和聚合物產品在醫療器械中有許多應用,并不斷開發和增強其性能。公司秉承為應用而研發,目前已擁有超過3000種產品。質量保證1、遵循ISO13485質量管理認證獲得美國FDA有效注冊遵守良好生產規范(cGMP)獲得管理系統CSMS認證特種化學行業公認的代言人功能強大、經濟實惠、安全可靠這么好的轉染試劑,難道你不心動嗎?華雅思創生物經營品牌經過幾年的不懈努力,華雅思創生物提供的產品覆蓋免疫細胞***、干細胞***、干細胞基礎研究、動物模型疾病研究、基因檢測(NGS)、試管嬰兒、產品質控等諸多熱點科學研究領域。如今,華雅思創已經成為Lifeline、Takara、細...
LipoFectMax?轉染試劑LipoFectMax?轉染試劑具有以下幾個優點:高轉染效率,適用于多種細胞系對細胞毒性低適用于DNA和RNA的轉染轉染前無需去除細胞培養基或血清轉染后無需清洗細胞或更換培養基轉染效率高,適用于多種細胞系圖1.LipoFectMax?轉染試劑以綠色熒光蛋白(GFP)表達質粒轉染幾種常見細胞系,通過檢測GFP信號比較轉染效率。細胞毒性低圖2.LipoFectMax?,LipoFectamine?2000及LipoFectamine?3000分別對A549細胞進行轉染操作,通過計算轉染后的細胞存活率比較細胞毒性。轉染的細胞類型可簡單分為兩大類,連續細胞系和原代細胞....
基于陽離子聚合物的轉染試劑,帶正電的聚合物與核酸帶負電的磷酸基團形成帶正電的復合物后與細胞表面帶負電的蛋白多糖相互作用,并通過內吞作用進入細胞。其又分為樹枝狀陽離子聚合物和線性陽離子聚合物兩類,前者細胞毒性相對較大,后者細胞毒性較小,但其轉染效率都高于脂質體轉染,適用也較為廣范。以上單一成分的轉染試劑或聚焦于提高效率或著重于降低細胞毒性,可謂魚和熊掌不可兼得也。新一代轉染試劑,不局限于單一成分,混合了不同配方的脂類(非脂質體)、加上蛋白質組分、以及各種的成分,兼具了轉染效率高和細胞毒性小的優勢,且操作更加簡單,易于高通量。轉染產品知多少——siRNA轉染試劑.上海慢病毒轉染試劑確定希望輸送的運...
細胞轉染過程X-tremeGENE9DNA轉染試劑簡介:X-tremeGENE9DNA轉染試劑是脂質和其它成分混合而得的一類多組份試劑,溶于80%乙醇中,經0.2μm濾膜過濾,然后封裝于玻璃小瓶中,適用于細胞分析的多種實驗。優勢:1.具有細胞毒性極低、轉染后細胞存活率高,生成可信任的生理學相關數據。2.操作簡便、節省時間,只需對X-tremeGENE9DNA轉染試劑進行簡單稀釋,再與質粒DNA共同孵育,即可直接向細胞添加反應混合物(有無血清均可)。3.對于常用細胞無需進行費時費力的優化工作。將EntransterTM-R4000稀釋液和agomir稀釋液充分混合.病毒轉染試劑羅氏X-Treme...
轉染試劑-AdvancedDNARNA西安中團生物中團生物中團生物微信號zhongtuanshengwu功能介紹西安中團生物科技有限公司坐落于陜西省西安市碑林區,是專門從事分子生物學、細胞生物學、免疫學、微生物學、臨床醫學試劑及儀器研究、銷售的高科技企業。中團生物與國內外大學、中科院及醫科院等科研機構建立了良好的合作關系。4月30日收錄于話題AdvancedDNARNA轉染試劑(AD600025、AD600050、AD600075、AD600150、AD600500、AD601000)貨號:AD600025、AD600050、AD600075、AD600150、AD600500、AD60100...
轉染48小時后,使用尼康熒光顯微鏡GFP熒光進行成像(左側四幅圖),A:LipoD293;B:293fectin;C:Xfect和D:Fugene6.帶有6xHis標記的GFP熒光蛋白使用Ni-NTA親和柱技術實現分離。5微升洗脫液載入SDS-PAGE凝膠電泳分離并進行Coomassie亮藍染色(右上圖E),道1為LipoD293293、道2為標準蛋白分子、道3為Xfect、道4為293fectin和道5為Fugene6。這四種轉染試劑產生蛋白質的效率被進一步定量(見右下圖F)。產生慢***的比較通過LipoD293?試劑(升級版)和LipofectamineLTX(LTX)試劑將三個cDNA...
轉染48小時后,使用尼康熒光顯微鏡GFP熒光進行成像(左側四幅圖),A:LipoD293;B:293fectin;C:Xfect和D:Fugene6.帶有6xHis標記的GFP熒光蛋白使用Ni-NTA親和柱技術實現分離。5微升洗脫液載入SDS-PAGE凝膠電泳分離并進行Coomassie亮藍染色(右上圖E),道1為LipoD293293、道2為標準蛋白分子、道3為Xfect、道4為293fectin和道5為Fugene6。這四種轉染試劑產生蛋白質的效率被進一步定量(見右下圖F)。產生慢***的比較通過LipoD293?試劑(升級版)和LipofectamineLTX(LTX)試劑將三個cDNA...
用LipoFectMax?轉染Hela細胞,左圖轉染GFPcDNA,右圖共轉染GFPCDNA和GFP靶向siRNA。轉染siRNA后可以從右圖明顯看到基因沉默。4適用于神經細胞的轉染圖4.用LipoFectMax?和LipoFectamine?2000分別對小鼠神經元細胞進行轉染綠色熒光白蛋白(GFP),轉染24小時后觀察轉染效果,LipoFectMax?轉染效率(左圖)比LipoFectamine?2000(右圖)高5倍。LipoFectMax?轉染試劑轉染試劑操作流程細胞毒性低圖2.LipoFectMax?,LipoFectamine?2000及LipoFectamine?3000分別對A...
超級好用的siRNA和miRNA轉染試劑——HiPerFect高效沉默低脫靶:HiPerFect是小RNA轉染試劑,這種非脂質體的脂質分子可以在siRNA低至100pM濃度的條件下轉染(推薦濃度是1nM-5nM)。保持高效基因沉默的同時降低脫靶效應,正是這一產品的精髓所在。除了siRNA,HiPerFect還能夠用于miRNA模擬物和***劑的轉染,滿足miRNA功能分析的需要。操作簡單,方便快速:HiperFect轉染試劑的方便程度也是***的,甚至***之內可以完成再次接種、轉染到檢測結果!這對于高通量反應簡直是求之不得的福音:轉染前將細胞按比例接種到24孔培養皿中,培養基可以是含有***...
LNCap細胞的培養和傳代嚴格由ATCC建議的操作步驟進行,與pBabe-hygro-SSeCKs(1.5ug)和pEGFP-N3(1:1,共1.0微克)共轉染(6孔板中每孔的量),并用LipoD293?試劑(左圖)和FugeneHD(右圖)分別按照生產制造商的科學實驗步驟進行轉染。轉染24小時后,用尼康Eclipse2000熒光顯微鏡檢測GFP熒光,以此來評價轉染效率。在血清和***的存在下,HepG2和SaoS-2細胞用pEGFP-N3和pSV-β-半乳糖苷酶DNAs分別轉染達到95%的細胞融合。轉染48小時后,分別通過Zeiss510激光共聚焦顯微鏡和β-半乳糖苷酶染色試劑盒檢測效率。質...
基于磷酸鈣成分的轉染試劑,其主要作用原理是與DNA通過沉淀反應形成磷酸鈣-DNA復合物,粘附到細胞膜表面,借助內吞作用進入細胞質。pH值,鈣離子濃度,DNA濃度,沉淀時間,細胞孵育時間乃至各組分加入順序都可能對結果產生影響,因此實驗條件摸索和優化時間較長,且重復性不佳。基于脂質體的轉染試劑包括中性脂質體和陽離子脂質體兩種。中性脂質體是利用脂質膜包裹DNA,借助脂質膜將DNA導入細胞膜內。目前應用比較***的是帶正電的陽離子脂質體轉染試劑,DNA并沒有預先包埋在脂質體中,而是帶負電的DNA自動結合到帶正電的脂質體上,形成DNA-陽離子脂質體復合物,從而吸附到帶負電的細胞膜表面,經過內吞被導入細胞...
圖5.Invivofectamine3.0試劑與靶向FVII的siRNA在單次靜脈注射后可在肝臟中引起劑量反應的敲低現象。Invivofectamine3.0試劑與靶向FVII的AmbioninvivosiRNA以0.02到2mg/kg的劑量進行注射。隨后分離血清并檢測FVII蛋白的水平(Biophen顯色檢測)。持續敲低能力在單次注射后可觀察到更長的敲低時間圖6.使用三種不同濃度的靶向FactorVII(FVII)的siRNA研究劑量效應。siRNA分子與Invivofectamine3.0試劑形成復合物后分別以1、0.5、及0.25mg/kg的劑量進行注射。在第2、5、9、16、23及30...
LipoFectMax?轉染試劑LipoFectMax?轉染試劑具有以下幾個優點:高轉染效率,適用于多種細胞系對細胞毒性低適用于DNA和RNA的轉染轉染前無需去除細胞培養基或血清轉染后無需清洗細胞或更換培養基轉染效率高,適用于多種細胞系圖1.LipoFectMax?轉染試劑以綠色熒光蛋白(GFP)表達質粒轉染幾種常見細胞系,通過檢測GFP信號比較轉染效率。細胞毒性低圖2.LipoFectMax?,LipoFectamine?2000及LipoFectamine?3000分別對A549細胞進行轉染操作,通過計算轉染后的細胞存活率比較細胞毒性。在經過***次傳代培養之后,原代培養物變成了一種細胞系...
用LipoFectMax?轉染Hela細胞,左圖轉染GFPcDNA,右圖共轉染GFPCDNA和GFP靶向siRNA。轉染siRNA后可以從右圖明顯看到基因沉默。4適用于神經細胞的轉染圖4.用LipoFectMax?和LipoFectamine?2000分別對小鼠神經元細胞進行轉染綠色熒光白蛋白(GFP),轉染24小時后觀察轉染效果,LipoFectMax?轉染效率(左圖)比LipoFectamine?2000(右圖)高5倍。LipoFectMax?轉染試劑轉染試劑操作流程細胞毒性低圖2.LipoFectMax?,LipoFectamine?2000及LipoFectamine?3000分別對A...
超級好用的siRNA和miRNA轉染試劑——HiPerFect高效沉默低脫靶:HiPerFect是小RNA轉染試劑,這種非脂質體的脂質分子可以在siRNA低至100pM濃度的條件下轉染(推薦濃度是1nM-5nM)。保持高效基因沉默的同時降低脫靶效應,正是這一產品的精髓所在。除了siRNA,HiPerFect還能夠用于miRNA模擬物和***劑的轉染,滿足miRNA功能分析的需要。操作簡單,方便快速:HiperFect轉染試劑的方便程度也是***的,甚至***之內可以完成再次接種、轉染到檢測結果!這對于高通量反應簡直是求之不得的福音:轉染前將細胞按比例接種到24孔培養皿中,培養基可以是含有***...