。一般情況下，**外一圈的孔只加培養(yǎng)基，不作為測定孔用。在培養(yǎng)基中加入CCK8，培養(yǎng)一定的時間，測定450 nm的吸光度即為空白對照。在做加藥實驗時，還應(yīng)考慮***的吸收，可在加入***的培養(yǎng)基中加入CCK8，培養(yǎng)一定的時間，測定450 nm的吸光度作為空白對照。金屬對CCK-8顯色有影響：當(dāng)終濃度為1mM的氯化亞鉛、氯化鐵、硫酸銅會***5%、15%、90%的顯色反應(yīng)，使靈敏度降級。如果終濃度是10 mM的話，將會*****。懸浮細(xì)胞由于染色比較困難，一般需要增加細(xì)胞數(shù)量和延長培養(yǎng)時間。***篩選：在測定一個***的毒性和安全有效濃度時，經(jīng)常會用到CCK-8。浙江cck8實驗步驟
cck8試劑加入后孵育時間，隨著時間的增加，OD值就會增大。總之原則就是把OD值控制在1.0左右。這里我考察了0.5h、1.0h、2.0h。再說一下關(guān)于種板設(shè)置問題。眾所周知周圍一圈孔因為邊緣效應(yīng)都是不用來做實驗的。一般每組樣品我會設(shè)置6個復(fù)孔，得到的OD值去掉**大值與**小值，其余取平均值。我用的是排***，會省很多力氣，但是也會增大組內(nèi)誤差。這個只有通過校正移液***和選用**適***頭了。能力有限，表達(dá)不清的大家湊合著看看吧。有疑問的歡迎大家留言討論，我們的目標(biāo)是共同進(jìn)步江蘇cck8數(shù)據(jù)sasCCK8原理、優(yōu)勢和步驟.
CCK-8的用途1.細(xì)胞增殖測定：細(xì)胞增殖實驗在很多領(lǐng)域都會用到，比如**相關(guān)、損傷后修復(fù)等。
2.***篩選：在測定一個***的毒性和安全有效濃度時，經(jīng)常會用到CCK-8。
3.細(xì)胞毒性測定：這個可以和各個處理因素對細(xì)胞活性和增殖的影響，比如在UV、低氧或者什么化學(xué)物品對細(xì)胞的影響上。
4.**藥敏試驗：這個是用的比較廣的，我見過做**的團(tuán)隊，買CCK-8都是一整箱，一整箱的買，比如果子老師所在的團(tuán)隊，哈哈哈。
5.微生物對細(xì)胞的毒性或增殖的實驗。
特點不同1、CellCountingKit-8：靈敏度高，數(shù)據(jù)可靠，重現(xiàn)性好；操作簡便，省時省力；水溶性，不需要換液，尤其適合于懸浮細(xì)胞；無需放射性同位素和有機(jī)溶劑，對細(xì)胞毒性低；適合于高通量***篩選。2、MTT法：特點是靈敏度高、經(jīng)濟(jì)。三、應(yīng)用不同1、CellCountingKit-8：主要用途為***篩選、細(xì)胞增殖測定、細(xì)胞毒性測定、**藥敏試驗。2、MTT法：***用于一些生物活性因子的活性檢測、大規(guī)模的抗*****篩選、細(xì)胞毒性試驗以及**放射敏感性測定等。CCK8的實驗步驟、實驗分組及檢測方法.
CCK8原理、優(yōu)勢和步驟 檢測原理：
◆ Cell Counting Kit簡稱CCK試劑盒，是一種基于WST-8（化學(xué)名：2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽）的廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒。
◆ WST-8屬于MTT的升級產(chǎn)品，工作原理為：在電子耦合試劑存在的情況下，可以被線粒體內(nèi)的脫氫酶還原生成高度水溶性的橙黃色的甲臜產(chǎn)物（formazan）。顏色的深淺與細(xì)胞的增殖成正比，與細(xì)胞毒性成反比。使用酶標(biāo)儀在450mM波長處測定OD值，間接反映活細(xì)胞數(shù)量。 細(xì)胞增殖測定：細(xì)胞增殖實驗在很多領(lǐng)域都會用到，比如**相關(guān)、損傷后修復(fù)等。江蘇cck8計算
CCK8試驗的總體實驗心得.浙江cck8實驗步驟
用途：
***篩選、
細(xì)胞增殖測定、
細(xì)胞毒性測定、
**藥敏試驗等。
所需設(shè)備及儀器：
10ul，100-200ul及多通道移液器
酶標(biāo)儀（帶有450nm濾光片）
96孔培養(yǎng)板
二氧化碳培養(yǎng)箱
培養(yǎng)0.5-4小時:細(xì)胞種類不同，形成的Formazan的量也不一樣。如果顯色不夠的話，可以繼續(xù)培養(yǎng)，以確認(rèn)比較好條件。特別是血液細(xì)胞形成的Formazan很少，需要較長的顯色時間（5-6小時）。
測定450nm吸光度：建議采用雙波長進(jìn)行測定，檢測波長450-490nm，參比波長600-650nm。 浙江cck8實驗步驟
上海儒安生物科技有限公司屬于醫(yī)藥健康的高新企業(yè)，技術(shù)力量雄厚。是一家有限責(zé)任公司企業(yè)，隨著市場的發(fā)展和生產(chǎn)的需求，與多家企業(yè)合作研究，在原有產(chǎn)品的基礎(chǔ)上經(jīng)過不斷改進(jìn)，追求新型，在強(qiáng)化內(nèi)部管理，完善結(jié)構(gòu)調(diào)整的同時，良好的質(zhì)量、合理的價格、完善的服務(wù)，在業(yè)界受到寬泛好評。以滿足顧客要求為己任；以顧客永遠(yuǎn)滿意為標(biāo)準(zhǔn)；以保持行業(yè)優(yōu)先為目標(biāo)，提供***的細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑，ecl發(fā)光液，cck8細(xì)胞增殖，內(nèi)參抗體。上海儒安生物科技將以真誠的服務(wù)、創(chuàng)新的理念、***的產(chǎn)品，為彼此贏得全新的未來！