多光子激光掃描顯微鏡行業發展,世界多光子激光掃描顯微鏡產業主要布局在德國和日本,德國是以徠卡顯微系統和蔡司為,而日本以尼康和奧林巴斯公司為,2020年,上述企業占據著世界多光子激光掃描顯微鏡市場64.44%的市場份額,其發展戰略左右著多光子激光掃描顯微鏡市場的走向。目前世界市場對多光子激光掃描顯微鏡的需求在增長,中國市場這方面的需求增長更快,未來五年多光子激光掃描顯微鏡市場的發展在中國將具有很大的發展潛力。多光子顯微鏡將生物打印結構準確定位和定向到特定的解剖部位,使其能夠在小鼠組織內制造復雜結構。美國全自動多光子顯微鏡研究
多束掃描技術可以同時對神經元組織的不同位置進行成像對兩個遠距離(相距大于1-2mm)的成像部位,通常使用兩條單獨的路徑進行成像;對于相鄰區域,通常使用單個物鏡的多光束進行成像。多光束掃描技術必須特別注意激發光束之間的串擾問題,這個問題可以通過事后光源分離方法或時空復用方法來解決。事后光源分離方法指的是用算法來分離光束消除串擾;時空復用方法指的是同時使用多個激發光束,每個光束的脈沖在時間上延遲,這樣就可以暫時分離被不同光束激發的單個熒光信號。引入越多路光束就可以對越多的神經元進行成像,但是多路光束會導致熒光衰減時間的重疊增加,從而限制了區分信號源的能力;并且多路復用對電子設備的工作速率有很高的要求;大量的光束也需要更高的激光功率來維持近似單光束的信噪比,這會容易導致組織損傷。美國嚙齒類多光子顯微鏡原理點掃描多光子顯微鏡可以深入樣本并捕捉高質量的圖像,但這個過程極其緩慢,因為圖像是一次形成一個點。
多光子顯微鏡成像深度深、對比度高,在生物成像中具有重要意義,但通常需要較高的功率。結合時間傳播的超短脈沖可以實現超快的掃描速度和較深的成像深度,但近紅外波段的光本身會導致分辨率較低。基于多光子上轉換材料和時間編碼結構光顯微鏡的高速超分辨成像系統(MUTE-SIM)是由清華大學教授和北京大學彭研究員合作開發的。可實現50MHz的超高掃描速度,突破衍射極限,實現超分辨率成像。與普通熒光顯微鏡相比,該顯微鏡經過改進,只需要較低的激發功率。這種超快、低功耗、多光子超分辨率技術在高分辨率生物深層組織成像中具有長遠的應用前景。
有許多方法可以實現快速光柵掃描,例如使用振鏡進行快速2D掃描,以及將振鏡與可調電動透鏡相結合進行快速3D掃描。而可調電動式鏡頭由于機械慣性的限制,無法在軸向快速切換焦點,影響成像速度。現在它可以被空間光調制器(SLM)取代。遠程對焦也是實現3D成像的一種手段,如圖2所示。LSU模塊中,掃描振鏡水平掃描,ASU模塊包括物鏡L1和反射鏡M,通過調整M的位置實現軸向掃描該技術不僅可以校正主物鏡L2引入的光學像差,還可以進行快速軸向掃描。為了獲得更多的神經元成像,可以通過調整顯微鏡的物鏡設計來放大FOV。然而,大NA和大FOV的物鏡通常很重,不能快速移動以進行快速軸向掃描,因此大FOV系統依賴于遠程聚焦、SLM和可調電動透鏡。多光子激光掃描顯微鏡是建立在激光掃描顯微鏡技術基礎上的實驗方法,三維觀察上提供更的光學切片能力。
多光子顯微鏡對成像深度的改善利用紅光或紅外光激發,光散射小(小粒子的散射與波長的四次方的成反比)。不需要***,能更多收集來自成像截面的散射光子。***不能區分由離焦區域或焦點區發射出的散射光子,多光子在深層成像信噪比好。單光子激發所用的紫外或可見光在光束到達焦平面之前易被樣品吸收而衰減,不易對深層激發。多光子熒光成像的特點。深度成像∶與共聚焦相比能更好地對厚散射物質成像。信噪比∶多光子吸收采用的波長是單光子吸收的2倍以上,所以顯微試樣中的瑞利散射更小,熒光測定的信噪比更高。觀察活細胞∶離子測量(i.e.Ca2+),GFP,發育生物學等—減少了光毒性和光漂白,能對細胞長時間觀察。多光子顯微鏡在臨床前評價IA形態、細胞外基質、細胞密度和血管形成等方面顯示出強大的作用。美國共聚焦多光子顯微鏡Ultima Investigator
中國市場多光子顯微鏡產量、消費量、進出口分析及未來趨勢。美國全自動多光子顯微鏡研究
作為一個多學科交叉、知識密集、資金密集的高技術產業,多光子顯微鏡涉及醫學、生物學、化學、物理學、電子學、工程學等學科,生產工藝相對復雜,進入門檻較高,是衡量一個國家制造業和高科技發展水平的重要標準之一。過去的5年,多光子顯微鏡市場集中,由于投產生產的成本較高,技術難度大,目前涌現的新企業不多。顯微鏡作為一個傳統的高科技行業,其作用至今沒有被其他技術顛覆,只是不斷融合并發展相關技術,在醫療和其他精密檢測領域發揮著更大的作用。顯微鏡的商業化發展已進入成熟期,主要需求來自教學、生命科學的研究及精密檢測等,全球市場呈現平緩的增長態勢。然而,顯微鏡產品(如多光子顯微鏡、電子顯微鏡)正拉動市場需求,多光子顯微鏡市場發展潛力巨大。美國全自動多光子顯微鏡研究