細(xì)胞凍存與復(fù)蘇技術(shù)是細(xì)胞生物學(xué)研究的關(guān)鍵支撐環(huán)節(jié)。在較低溫環(huán)境下(通常為 -80°C 或液氮溫度 -196°C),細(xì)胞的代謝近乎停滯,得以長期保存。凍存時(shí),需精心調(diào)配保護(hù)劑,如二甲基亞砜(DMSO)與血清的混合液,減緩冰晶形成對(duì)細(xì)胞的損傷。復(fù)蘇過程則如同喚醒沉...
干細(xì)胞技術(shù)是細(xì)胞生物學(xué)領(lǐng)域的前沿研究方向之一。干細(xì)胞具有自我更新和分化為多種細(xì)胞類型的能力。胚胎干細(xì)胞來源于早期胚胎,具有全能性,能夠分化為人體的各種細(xì)胞、組織和補(bǔ)位,在再生醫(yī)學(xué)領(lǐng)域具有巨大的潛在應(yīng)用價(jià)值,例如可用于修復(fù)受損的心臟組織、神經(jīng)組織等,但由于其來源...
在細(xì)胞凋亡研究中,多種技術(shù)相輔相成。Annexin V - FITC/PI 雙染法是常用手段,Annexin V 對(duì)磷脂酰絲氨酸具有高度親和力,在細(xì)胞凋亡早期,磷脂酰絲氨酸從細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)翻轉(zhuǎn)到外側(cè),Annexin V 與之結(jié)合,而 PI 可穿透死亡細(xì)胞的細(xì)胞膜,...
細(xì)胞成像技術(shù)堪稱窺探細(xì)胞微觀世界的窗口,近年來取得了明顯革新。傳統(tǒng)光學(xué)顯微鏡受限于分辨率,難以看清細(xì)胞內(nèi)精細(xì)結(jié)構(gòu)。如今,超分辨顯微鏡技術(shù)突破這一瓶頸,像 STORM(隨機(jī)光學(xué)重建顯微鏡)和 PALM(光激發(fā)定位顯微鏡),利用熒光分子的開關(guān)特性,將分辨率提升至納...
細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)服務(wù)的蓬勃發(fā)展離不開專業(yè)人才培養(yǎng)與教育普及。高校與科研機(jī)構(gòu)開設(shè)豐富的細(xì)胞生物學(xué)課程,從基礎(chǔ)理論到前沿技術(shù)實(shí)踐,多方面武裝學(xué)生頭腦。實(shí)驗(yàn)教學(xué)環(huán)節(jié),學(xué)生親手操作細(xì)胞培養(yǎng)、染色、檢測(cè)等實(shí)驗(yàn),積累實(shí)操經(jīng)驗(yàn)。專業(yè)培訓(xùn)研討會(huì)定期舉辦,聚焦新技術(shù)應(yīng)用、難點(diǎn)攻克...
細(xì)胞信號(hào)通路調(diào)控著細(xì)胞的生長、分化、代謝和凋亡等各種生理過程,對(duì)其研究有助于深入了解細(xì)胞的行為和疾病的發(fā)病機(jī)制。常用的研究技術(shù)包括 Western blotting,通過檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)特定蛋白質(zhì)的表達(dá)水平和磷酸化狀態(tài),來分析信號(hào)通路中關(guān)鍵蛋白的激發(fā)情況。例如,在研...
細(xì)胞代謝組學(xué)聚焦細(xì)胞內(nèi)代謝物的全景分析,致力于解開細(xì)胞這座 “能量工廠”。它整合先進(jìn)的質(zhì)譜分析、核磁共振技術(shù),對(duì)細(xì)胞內(nèi)眾多小分子代謝物,如糖類、脂肪酸、氨基酸及其衍生物等進(jìn)行精細(xì)定量與定性。在瘤子研究領(lǐng)域,通過對(duì)比腫瘤細(xì)胞與正常細(xì)胞代謝組差異,發(fā)現(xiàn)腫瘤細(xì)胞獨(dú)特...
干細(xì)胞技術(shù)是細(xì)胞生物學(xué)領(lǐng)域的前沿研究方向之一。干細(xì)胞具有自我更新和分化為多種細(xì)胞類型的能力。胚胎干細(xì)胞來源于早期胚胎,具有全能性,能夠分化為人體的各種細(xì)胞、組織和補(bǔ)位,在再生醫(yī)學(xué)領(lǐng)域具有巨大的潛在應(yīng)用價(jià)值,例如可用于修復(fù)受損的心臟組織、神經(jīng)組織等,但由于其來源...
細(xì)胞模型構(gòu)建技術(shù)是研究復(fù)雜細(xì)胞現(xiàn)象的有力工具,能模擬真實(shí)細(xì)胞情境。三維細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)打破傳統(tǒng)二維培養(yǎng)的局限,利用生物材料支架或微流控芯片構(gòu)建類似體內(nèi)組織的三維結(jié)構(gòu),使細(xì)胞間及細(xì)胞與基質(zhì)間相互作用更自然,用于瘤子微環(huán)境模擬、藥物篩選等。類部位培養(yǎng)技術(shù)更是一大突破,...
細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)雖發(fā)展迅速,但面臨不少挑戰(zhàn)。在細(xì)胞培養(yǎng)方面,原代細(xì)胞的獲取和培養(yǎng)難度較大,且細(xì)胞在體外培養(yǎng)過程中可能會(huì)發(fā)生分化、衰老等變化,影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性。細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率的提高是一大難題,不同細(xì)胞類型對(duì)轉(zhuǎn)染方法的敏感性差異較大,且部分轉(zhuǎn)染試劑具有細(xì)胞毒性。熒...
細(xì)胞凍存與復(fù)蘇技術(shù)是細(xì)胞生物學(xué)研究的關(guān)鍵支撐環(huán)節(jié)。在較低溫環(huán)境下(通常為 -80°C 或液氮溫度 -196°C),細(xì)胞的代謝近乎停滯,得以長期保存。凍存時(shí),需精心調(diào)配保護(hù)劑,如二甲基亞砜(DMSO)與血清的混合液,減緩冰晶形成對(duì)細(xì)胞的損傷。復(fù)蘇過程則如同喚醒沉...
細(xì)胞并非孤立存在,細(xì)胞互作研究技術(shù)致力于揭示它們的 “社交網(wǎng)絡(luò)”。免疫共沉淀結(jié)合質(zhì)譜技術(shù)(Co-IP-MS)常用于挖掘蛋白質(zhì) - 蛋白質(zhì)相互作用,通過特異性抗體捕獲目標(biāo)蛋白及其結(jié)合伴侶,經(jīng)質(zhì)譜鑒定揭示細(xì)胞信號(hào)通路上下游蛋白關(guān)聯(lián),闡釋細(xì)胞間通訊分子機(jī)制。鄰近細(xì)胞...
蛋白質(zhì)印跡(Western blot)用于檢測(cè)細(xì)胞或組織中的特定蛋白質(zhì)表達(dá)水平。服務(wù)機(jī)構(gòu)首先提取細(xì)胞或組織中的蛋白質(zhì),通過 SDS - PAGE 電泳將蛋白質(zhì)分離,然后轉(zhuǎn)印到膜上,用特異性抗體進(jìn)行孵育和檢測(cè)。在研究肌肉細(xì)胞中的特定蛋白變化時(shí),技術(shù)人員會(huì)仔細(xì)優(yōu)化...
細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)服務(wù)涵蓋多種技術(shù),以細(xì)胞培養(yǎng)為例,其原理是將細(xì)胞從生物體中取出,在體外模擬體內(nèi)的生理環(huán)境,提供適宜的溫度、濕度、營養(yǎng)物質(zhì)等條件,使細(xì)胞能夠生存、生長、繁殖。如在培養(yǎng)哺乳動(dòng)物細(xì)胞時(shí),需提供含有人工合成培養(yǎng)基、血清、抑生素等成分的培養(yǎng)液。而細(xì)胞轉(zhuǎn)染技...
細(xì)胞增殖檢測(cè)技術(shù)是細(xì)胞生物學(xué)研究的重要手段。MTT 法是較為經(jīng)典的方法,其原理基于活細(xì)胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性 MTT 還原為不溶性的藍(lán)紫色結(jié)晶甲瓚并沉積在細(xì)胞中,而死細(xì)胞無此功能。通過酶標(biāo)儀測(cè)定其吸光度值,可間接反映活細(xì)胞數(shù)量。CCK - 8 法與...
細(xì)胞增殖檢測(cè)技術(shù)是細(xì)胞生物學(xué)研究的重要手段。MTT 法是較為經(jīng)典的方法,其原理基于活細(xì)胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性 MTT 還原為不溶性的藍(lán)紫色結(jié)晶甲瓚并沉積在細(xì)胞中,而死細(xì)胞無此功能。通過酶標(biāo)儀測(cè)定其吸光度值,可間接反映活細(xì)胞數(shù)量。CCK - 8 法與...
細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)在眾多領(lǐng)域發(fā)揮關(guān)鍵作用。在生物制藥領(lǐng)域,通過細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)重組蛋白藥物,如胰島素、干擾素等,利用細(xì)胞作為 “工廠” 高效合成藥用蛋白。在瘤子研究中,借助細(xì)胞轉(zhuǎn)染技術(shù)將致病基因或抑病基因?qū)爰?xì)胞,構(gòu)建腫瘤細(xì)胞模型,研究瘤子發(fā)長頭發(fā)展機(jī)制,篩選抗病...
細(xì)胞衰老檢測(cè)技術(shù)如同精細(xì)的 “時(shí)鐘”,追蹤著細(xì)胞的老化進(jìn)程。β - 半乳糖苷酶染色是經(jīng)典方法,衰老細(xì)胞中該酶活性升高,染色后呈現(xiàn)藍(lán)色,借此可直觀區(qū)分衰老與年輕細(xì)胞。端粒長度檢測(cè)則從分子層面反映細(xì)胞衰老,短端粒與細(xì)胞衰老緊密相關(guān),利用 PCR 技術(shù)或熒光原位雜交...
細(xì)胞免疫熒光技術(shù)可用于細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)的定位和表達(dá)分析。服務(wù)機(jī)構(gòu)首先會(huì)對(duì)細(xì)胞進(jìn)行固定和通透處理,使抗體能夠進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)與目標(biāo)蛋白結(jié)合。接著,用特異性的熒光標(biāo)記抗體孵育細(xì)胞,通過熒光顯微鏡觀察細(xì)胞內(nèi)熒光信號(hào)的分布和強(qiáng)度。在研究神經(jīng)細(xì)胞中的特定蛋白分布時(shí),技術(shù)人員會(huì)精心...
細(xì)胞并非孤立存在,細(xì)胞互作研究技術(shù)致力于揭示它們的 “社交網(wǎng)絡(luò)”。免疫共沉淀結(jié)合質(zhì)譜技術(shù)(Co-IP-MS)常用于挖掘蛋白質(zhì) - 蛋白質(zhì)相互作用,通過特異性抗體捕獲目標(biāo)蛋白及其結(jié)合伴侶,經(jīng)質(zhì)譜鑒定揭示細(xì)胞信號(hào)通路上下游蛋白關(guān)聯(lián),闡釋細(xì)胞間通訊分子機(jī)制。鄰近細(xì)胞...
細(xì)胞并非孤立存在,細(xì)胞互作研究技術(shù)致力于揭示它們的 “社交網(wǎng)絡(luò)”。免疫共沉淀結(jié)合質(zhì)譜技術(shù)(Co-IP-MS)常用于挖掘蛋白質(zhì) - 蛋白質(zhì)相互作用,通過特異性抗體捕獲目標(biāo)蛋白及其結(jié)合伴侶,經(jīng)質(zhì)譜鑒定揭示細(xì)胞信號(hào)通路上下游蛋白關(guān)聯(lián),闡釋細(xì)胞間通訊分子機(jī)制。鄰近細(xì)胞...
細(xì)胞基因編輯技術(shù)仿佛神奇的 “基因剪刀”,能夠改寫細(xì)胞的遺傳密碼。CRISPR - Cas9 技術(shù)是當(dāng)下較耀眼的明星,它精細(xì)定位目標(biāo)基因,切割 DNA 雙鏈,實(shí)現(xiàn)基因敲除、插入或替換。在遺傳疾病醫(yī)療領(lǐng)域,針對(duì)鐮刀型細(xì)胞貧血癥等單基因遺傳病,將糾正后的正?;?qū)?..
細(xì)胞表面受體如同細(xì)胞的 “順風(fēng)耳” 與 “傳聲筒”,掌控著細(xì)胞對(duì)外界信號(hào)的接收與傳遞,相關(guān)研究技術(shù)致力于解鎖這一通訊密碼。放射性配體結(jié)合測(cè)定法,利用放射性標(biāo)記的配體與細(xì)胞表面受體特異性結(jié)合,精確測(cè)量受體的數(shù)量、親和力及結(jié)合動(dòng)力學(xué)參數(shù),探究受體功能特性。在神經(jīng)科...
細(xì)胞增殖和凋亡是細(xì)胞生物學(xué)中的重要過程,對(duì)其檢測(cè)有助于了解細(xì)胞的生長狀態(tài)和疾病的發(fā)長頭發(fā)展機(jī)制。細(xì)胞增殖檢測(cè)方法有多種,如 MTT 法,該方法基于活細(xì)胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能夠?qū)?MTT 還原為不溶于水的藍(lán)紫色甲瓚結(jié)晶,通過測(cè)量甲瓚的吸光度來反映細(xì)胞的增殖活...
細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)具有諸多優(yōu)勢(shì)。細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)能在體外對(duì)細(xì)胞進(jìn)行大規(guī)模擴(kuò)增,為后續(xù)實(shí)驗(yàn)提供充足的細(xì)胞樣本,且可精確控制培養(yǎng)條件,研究單一因素對(duì)細(xì)胞的影響。細(xì)胞轉(zhuǎn)染技術(shù)實(shí)現(xiàn)了對(duì)細(xì)胞基因組的定向修飾,為基因功能研究和基因醫(yī)療提供了有力手段。熒光標(biāo)記技術(shù)具有高靈敏度和特異...
量子點(diǎn)標(biāo)記技術(shù)猶如一盞明燈,照亮了細(xì)胞微觀世界的隱秘角落。與傳統(tǒng)熒光染料相比,量子點(diǎn)具有獨(dú)特優(yōu)勢(shì),其發(fā)射光譜窄且對(duì)稱,顏色鮮艷持久,可同時(shí)使用多種量子點(diǎn)對(duì)細(xì)胞內(nèi)不同靶點(diǎn)進(jìn)行標(biāo)記,實(shí)現(xiàn)多色成像。例如在瘤子免疫研究中,用不同顏色量子點(diǎn)分別標(biāo)記瘤子細(xì)胞、免疫細(xì)胞及其...
單細(xì)胞分析技術(shù)能揭示細(xì)胞的異質(zhì)性。單細(xì)胞測(cè)序技術(shù)可對(duì)單個(gè)細(xì)胞的基因組、轉(zhuǎn)錄組、表觀基因組等進(jìn)行測(cè)序分析。以單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組測(cè)序?yàn)槔紫葘蝹€(gè)細(xì)胞分離出來,提取 RNA 并逆轉(zhuǎn)錄為 cDNA,然后進(jìn)行 PCR 擴(kuò)增,構(gòu)建測(cè)序文庫,通過高通量測(cè)序,可獲得每個(gè)細(xì)胞的基...
蛋白質(zhì)印跡(Western blot)用于檢測(cè)細(xì)胞或組織中的特定蛋白質(zhì)表達(dá)水平。服務(wù)機(jī)構(gòu)首先提取細(xì)胞或組織中的蛋白質(zhì),通過 SDS - PAGE 電泳將蛋白質(zhì)分離,然后轉(zhuǎn)印到膜上,用特異性抗體進(jìn)行孵育和檢測(cè)。在研究肌肉細(xì)胞中的特定蛋白變化時(shí),技術(shù)人員會(huì)仔細(xì)優(yōu)化...
細(xì)胞增殖和凋亡是細(xì)胞生物學(xué)中的重要過程,對(duì)其檢測(cè)有助于了解細(xì)胞的生長狀態(tài)和疾病的發(fā)長頭發(fā)展機(jī)制。細(xì)胞增殖檢測(cè)方法有多種,如 MTT 法,該方法基于活細(xì)胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能夠?qū)?MTT 還原為不溶于水的藍(lán)紫色甲瓚結(jié)晶,通過測(cè)量甲瓚的吸光度來反映細(xì)胞的增殖活...
細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞器猶如一個(gè)個(gè)微型 “部位”,各司其職,細(xì)胞器分離與功能鑒定技術(shù)深入剖析它們的奧秘。差速離心法依據(jù)細(xì)胞器大小、密度差異,初步分離出細(xì)胞核、線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等,后續(xù)結(jié)合密度梯度離心進(jìn)一步純化。對(duì)于線粒體,運(yùn)用氧電極技術(shù)測(cè)定其呼吸功能,評(píng)估能量代謝效率;針對(duì)...