泛素化修飾蛋白質組學樣品要求:1、動物組織的樣品量濕重不少于200mg。2、植物細菌、噬菌體等微生物類樣品量濕重不少于2g。3、富含雜質或蛋白質含量低的樣品量濕重不少于5g;如植物的根,木質部、韌皮部組織等。4、體液類(唾液、羊水、腦脊液等)10mL以上,要保證不能溶血;血清要求500μl以上;尿液要求50mL以上。5、如直接提供蛋白質提取物,濃度不少于2 mg/mL,總量不少于1 mg。為保證實驗效果,請盡量告知緩沖液成分,如是否有硫脲、SDS、強離子鹽等等。另樣品中應不含核酸、脂類、多糖等影響分離效果的成分。6、在細胞器蛋白質組學方面,提取細胞器或亞細胞器后,蛋白沉淀量在1 mg以上。在早期的研究中,乙酰化修飾一直被認為是真核細胞所特有的一種翻譯后修飾。北京蛋白質琥珀酰化修飾組學類型
蛋白質翻譯后修飾在蛋白質中磷酸化位點分析時應該注意些什么問題?覆蓋率:覆蓋率越高,檢測和鑒定含有修飾基團的肽幾率就越大。修飾位點的占有率:被修飾的蛋白質的百分比低,則檢測到修飾肽的機會會隨之減少。如果百分比較高(> 30%),則有助于識別修飾位點。棕櫚酰化蛋白修飾質譜鑒定方法:S-棕櫚酰化的主要功能是促進蛋白質與細胞膜的結合。蛋白質可以由一個棕櫚酰基組成,也可以與更多棕櫚基或與其他脂質,如豆蔻酰基。由于對S-棕櫚酰化蛋白分析仍然具有挑戰性,由于S-棕櫚酰化修飾蛋白亞水平以及疏水性和潛在不穩定的硫代質鏈的S-脂酰化肽。蛋白質氧化修飾組學價格在蛋白翻譯后修飾方式的鑒定過程中,蛋白會首先被酶切成肽段,然后進入質譜進行分析。
蛋白質乙酰化修飾組學技術服務:乙酰化修飾是體內高度保守的可逆轉的蛋白修飾,對細胞核內轉錄調控因子的刺激有著非常重要的作用。此外,還存在大量的非組蛋白乙酰化修飾參與了代謝通路及代謝酶活性的調節。乙酰化修飾組學技術服務采用肽段預分離降低高豐度組蛋白對蛋白乙酰化鑒定的影響,再結合免疫共沉淀通過高效的抗體富集乙酰化的肽段,從而實現大規模乙酰化的鑒定及定量。蛋白質泛素化修飾組學技術服務:泛素化修飾是一種重要的翻譯后修飾。泛素-蛋白酶體系統介導了真核生物體內80%~85%的蛋白質降解。此外,泛素化修飾還可以直接影響蛋白質的活性和定位,調控包括細胞周期、細胞凋亡、轉錄調控、DNA 損傷修復以及免疫應答等在內的多種細胞活動。
磷酸化修飾蛋白質組學服務:蛋白質的磷酸化修飾是生物體內重要的共價修飾方式之一。磷酸化修飾本身所具有的簡單、靈活、可逆的特性,以及磷酸基團的供體ATP的易得性,使得磷酸化修飾被真核細胞所選擇接受成為一種比較普遍的調控手段。蛋白質的磷酸化和去磷酸化這一可逆過程,幾乎調節著包括細胞的增殖、發育、分化、細胞骨架調控、細胞凋亡、神經活動、肌肉收縮、新陳代謝發生等生命活動的所有過程,并且可逆的蛋白質磷酸化是目前所知道的比較主要的信號轉導方式。目前已經知道有許多人類疾病是由于異常的磷酸化修飾所引起,而有些磷酸化修飾卻是某種疾病所導致的后果。蛋白質翻譯后修飾組學是通過在一個或多個氨基酸殘基加上修飾基團,可以改變蛋白質的物理、化學性質。
泛素化修飾蛋白質組學介紹: 蛋白質泛素化修飾(Ubiquitylation)是一種常見的蛋白質翻譯后修飾,是指一個或多個泛素分子(Ubiquitin,由76個氨基酸組成的多肽)在一系列特殊的酶作用下,將細胞內的蛋白質分類,從中選出靶蛋白分子,并對靶蛋白進行特異性修飾的過程。泛素化修飾是一種重要的翻譯后修飾,泛素-蛋白酶體系統介導了真核生物80%~85%的蛋白質降解。除參與蛋白質降解之外,泛素化修飾還參與了細胞周期、增殖、細胞凋亡、分化、轉錄調控、基因表達、轉錄調節、信號傳遞、損傷修復、炎癥免疫等幾乎一切生命活動的調控。蛋白質翻譯后修飾是一種化學修飾,在功能蛋白質組中發揮關鍵作用。湖北蛋白質甲基化修飾組學技術服務
糖基化蛋白質翻譯修飾組學主要在復雜的多細胞或組織形成過程中起關鍵作用。北京蛋白質琥珀酰化修飾組學類型
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