胎牛血清:解凍胎牛血清時,請按照規定的的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫),若胎牛血清解凍時改變的溫度太大(如-20℃至37℃),實驗顯示非常容易產生沉淀物。解凍胎牛血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發生。請勿將胎牛血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,胎牛血清會變得混濁,同時胎牛血清中許多較不穩定的成分也會因此受到損害,而影響胎牛血清的質量。胎牛血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。若必須做胎牛血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻。胎牛血清是細胞培養中用量較大的天然培養基。寧波去外泌體血清供應商
胎牛血清制備:用止血鉗夾住血管,切開1厘米左右的切口進行插管,插好管后打開血管的止血鉗,讓牛血順采的血管流入另一個潔凈房間內的瓶中。采的血瓶采的血前經干烤滅菌(180℃2小時)后,按無菌操作注入10毫升左右經高壓滅菌的生理鹽水后加塞封口,于采的血前半小時放入37℃恒溫箱備用。采的血前先晃動瓶內生理鹽水,使其充分濕潤瓶壁后倒出,再進行采的血并加塞封口。將采的血后的瓶放37℃恒溫室2小時,再放入4℃冷庫4小時以備離心。寧波去外泌體血清供應商血清的保存應該注意:需要長期保存的血清必須儲存于-20℃-70℃低溫冰箱中。
胎牛血清的主要成分有哪些?脂聯素,有人發現,將牛脂聯素注射入C57小鼠,可降低循環血糖水平和在高脂飲食后提高脂肪清理率。持續注射牛脂聯素兩周后,胰島素敏感性和葡萄糖耐受性明顯增強,高脂喂養小鼠肝臟脂質堆積減少。這些結果提供了直接的證據表明內源性牛脂聯素是一種調節脂肪和葡萄糖代謝的生理Hormone。以上可以看到,胎牛血清提供的一些活性因子參與營養的運輸、促進營養分子向細胞的轉運和利用,調節細胞的代謝和生理狀態。可見胎牛血清在細胞環境中發揮著積極的作用,這是人工合成的基礎培養基所比擬不了的。
如何挑選好的胎牛血清:好的胎牛血清是實驗的成功的前提是所有實驗人做細胞培養的共識,如何挑選好的胎牛血清,可以從以下幾個方面著手。1.外觀,好的血清應是透明清亮,土黃色或棕黃色,無沉淀或極少沉淀,比較粘稠。如發現血清渾濁,不透明,含許多沉淀物,說明血清污染或血清中的蛋白質變性;若棕紅色,說明,血清中的血紅蛋白含量太高,有溶血現象。2、總蛋白含量,胎牛血清一般范圍是30-40mg/ml,數值偏高,說明牛齡偏大,不是胎牛;數值偏低,表明血清可能摻水了。3、血紅蛋白,標準為不高于,20mg/dl,顏色越紅,數值越高;反之,數值越低。4、pH國產血清,大多高于7.5,進口胎牛血清,大多低于7.5,具體原因未知,可能和牛齡有關。一般廠商提供的血清為無菌,無需再過濾除菌,如發現血清有懸浮物,則可將血清加入培養液內一起過濾。
胎牛血清有必要做熱滅活嗎?實驗證明,經過正確處理的熱滅活胎牛血清,對于大多數的細胞而言都是不需要的。經此處理過的血清對細胞的生長只有微小的促進,或完全沒有任何作用,甚至可能因為高溫處理影響了血清的質量,從而造成細胞生長速率的降低。經過熱處理的血清,沉淀物的形成會明顯的增多,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,像是“小黑點”,常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染,而把血清放在37℃環境中,又會使此類沉淀物增加得更多,這常常會使研究者誤認為是微生物的分裂擴增。因此我們建議客戶,若非必須,可以不需要做熱處理這一步。如此一來,不但節省客戶寶貴的時間,更確保血清的質量。每100ml人血清含有蛋白質6-8g,其中主要是白蛋白和球蛋白。寧波賽業胎牛血清品牌
胎牛血清的無菌檢驗:陰性;支原體檢驗: 陰性;細菌內有毒的 ≤5(EU/ml)。寧波去外泌體血清供應商
為什么要熱滅活胎牛血清?胎牛血清加熱可以滅活補體系統。開啟的補體參與溶解細胞事件,刺激平滑肌收縮,細胞和血小板釋放組胺,開啟淋巴細胞和巨噬細胞。在免疫學研究,培養ES細胞,昆蟲細胞和平滑肌細胞時,推薦使用熱滅活胎牛血清。為什么儲存在冰箱中的胎牛血清會出現少量沉淀?胎牛血清沒有預老化,儲存在2-8℃時,血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。這應該不會影響血清的質量。推薦在-20℃儲存胎牛血清,避免反復凍融。寧波去外泌體血清供應商
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