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來源: 發布時間:2025-05-20

在生物工藝中,核酸酶的主要作用是高效消化宿主細胞DNA(HCD),并將其分解成足夠小的片段,以便在下游純化過程中去除。雖然大多數核酸酶可以在生理鹽條件下高效地將裸DNA降解成微小片段,比如Benzonase和SANs都可以把dsDNA分解成小于8nt的寡核苷酸鏈,但實際生產中的核酸污染情況更加復雜。HCD通常以染色質形式存在,與細胞裂解碎片、病毒顆粒等結合在一起,影響核酸酶的識別及剪切。因此,HCD去除的關鍵在于——核酸酶如何在復雜的生產體系中識別并剪切HCD。 SAN HQ高鹽核酸酶具有熱不穩定的特性,在還原劑存在條件下,50℃、30min孵育即可失活;湖州70921-160高鹽核酸酶工廠直銷

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ArcticZymes Technologies于2017年推出了SAN HQ高鹽核酸酶及其對應的SAN HQ ELISA kit。該試劑盒原理是采用雙抗夾心法定量檢測各種生物制品的中間品、半成品和成品中SAN HQ高鹽核酸酶的殘留含量,特異性的anti-SAN作為捕獲抗體偶聯在96-well plate,生物素Biotin標記anti-SAN作為檢測抗體,鏈霉親和素-HRP偶聯物起到信號放大作用,TMB是終反應底物。該試劑盒特異識別SAN HQ高鹽核酸酶,對其它核酸酶沒有特異性結合。它的定量范圍是0.4-25.6ng/ml,檢測精確度高RSD<=15%,2-8℃條件下保存12個月。常州70921-160高鹽核酸酶聯系方式ArcticZymes Technologies成立于20世紀80年代后期,總部位于挪威北部的特羅姆瑟(Troms?)。

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市售的SAN HQ高鹽核酸酶有三個規格,分別是25kU、500kU及5MU,分別滿足研發初期及大規模生產各階段的要求。通過SDS-PAGE檢測蛋白純度在98%以上。基于ArcticZymes Technologies的30年的酶學開發及大規模生產經驗,SAN HQ的生產體系穩定,產品純度高,批次一致性好,無蛋白酶活性。廠家開發出特異的緩沖液體系,使SAN HQ保存起來更加穩定,-15℃ - -30℃條件下有效期3年左右。研究數據表明,經過5-6次的反復凍融,SAN HQ高鹽核酸酶活性沒有明顯變化。

AAV病毒滴度通常分為物理滴度和infection滴度。物理滴度一般是指基因組滴度或者衣殼滴度。在測定AAV的含量時,通常采用基因組滴度或者衣殼滴度作為單位,其中基因組滴度為攜帶基因組的AAV的濃度,衣殼滴度為AAV物理顆粒的濃度。基因組滴度一般采用qPCR、ddPCR、染料法、UV/Vis等方法來測定;衣殼滴度主要是通過ELISA、HPLC等方法來測定。AAV基因組滴度檢測的關鍵在于盡可能徹底去除AAV衣殼外的HCD殘留,減少污染核酸對qPCR或ddPCR的影響。經典方法是加入常規核酸酶(如Dnase I、Benzonase等)消化AAV衣殼外的HCD殘留,然后加入Proteinase K破碎病毒衣殼,進行后續檢測。經過對比發現,用SAN HQ高鹽核酸酶替代常規核酸酶處理AAV病毒,能夠更高效去除衣殼外的核酸殘留,qPCR或ddPCR結果重復性更高、更穩定。ArcticZymes于2005年在Olso證券交易所上市,精于規模化生產獨特特性的酶產品。

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ArcticZymes Technologies推出了SAN HQ高鹽核酸酶和M-SAN HQ中鹽核酸酶,為生物工藝領域提供了革新性、更高效的方案來解決大規模生產中核酸殘留問題。此前,受限于鹽濃度和核酸酶活性的負調控效應,行業在核酸殘留去除效果和酶成本之間尋找平衡,更多的是讓工藝選擇適應酶。此后,行業可以根據工藝具體需求而選擇更合適的酶產品,既能達到理想的去除效果,又能輕松控制酶用量及綜合成本,真正實現讓酶適應工藝選擇。SAN HQ和M-SAN HQ為行業提供更高效率的解決方案。徐州高鹽核酸酶售后服務哪家好呢,歡迎咨詢上海倍篤生物 。合肥倍篤高鹽核酸酶代理商

SAN HQ高鹽核酸酶在高鹽濃度下活性更適,DNA去除效率更高。湖州70921-160高鹽核酸酶工廠直銷

離子交換層析 (IEC) 是一種簡單、通用且經濟高效的技術,已成為許多載體純化的關鍵步驟。IEC分為陰離子/陽離子交換柱,其中AEC(Anion-exchange chromatography)適用于AAV純化,是大規模AAV生產中去除空衣殼的主要手段。AAV衣殼亞種之間因表面電荷的差異導致不同的的等電點。空衣殼PI在6.3左右,包裝了完整基因組DNA后的病毒顆粒PI大致為5.9。AAV與基質之間的靜電相互作用正是取決于衣殼的等電點(pI)和緩沖液的pH值。基于這一原理在正電荷固定相上進行樣品的分離純化,去除雜質(如空衣殼和部分衣殼),并有效地回收目的載體。湖州70921-160高鹽核酸酶工廠直銷