低甲基化，原*基因***正常細胞中，由于甲基化作用原*基因多處于沉默狀態，但在多種**細胞中，均發現原*基因處于低甲基化狀態，并且低甲基化狀態與其蛋白表達升高密切相關，表明低甲基化狀態可使原*基因***。轉座子活化轉座子是可移動的基因序列，包括LINE-1、HERV-K等，在人類基因組中含量豐富，正常情況下處于被甲基化狀態而轉錄沉默。而在**細胞中，由于基因組總體甲基化水平的降低，這些序列也因去甲基化而活化，轉移位置導致基因片段的插入和缺失。芯片平臺作為目前比較成熟的篩選工具。上海TBSDNA甲基化歡迎咨詢

芯片種類：Agilent**甲基化芯片，8x60K●和合作伙伴在Agilent公司定制的Promoter芯片?！窠^大多數基因是針對基因啟動子區域的CpG島設計探針?！裥酒弦还灿?160個功能注釋比較明確的基因，其中2128個和**發生有關系?！駨墓δ苌戏郑?56基因和細胞凋亡有關，1273個基因和信號傳導有關，487個基因和壓力和衰老有關?！裉貏e適用于**甲基化研究。案例分析：用Agilent定制甲基化芯片和表達譜芯片共同篩選乳腺*患者的高甲基化基因，并探討甲基化與基因表達的關系為了尋找乳腺*早期診斷的甲基化標記基因，探討基因甲基化水平與基因表達量之間的關系，科研者使用甲基化芯片和表達譜芯片進行了相關研究。研究中，甲基化程度檢測使用BSP法和COBRA分析，基因表達水平檢測用RT-PCR。結果，在乳腺*患者中檢測到70對高度甲基化差異***的基因，表達譜芯片分析結果顯示在乳腺*患者中這70個基因大部分不表達；RT-PCR結果也顯示大部分基因表達量很低甚至不表達。這種研究策略，能夠直觀方便的篩查患者甲基化基因，有效地尋找乳腺*標記基因，對研究甲基化基因調控基因表達提供研究基礎。浙江TBSDNA甲基化售后分析6mA在細菌、藻類及動植物基因組中存在。

強化RRBS——高性價比DNA甲基化檢測方案。單堿基分辨率，全基因組范圍，富集啟動子/CpG島甲基化調控區域，適合人和哺乳動物、動物及魚類，適合細胞、全血及新鮮冷凍組織，不適合cfDNA及FFPE等片段化樣本。項目介紹：簡化基因組甲基化測序(ReducedRepresentationBisulfiteSequencing,RRBS)是通過限制性酶切的方法富集基因組DNA上富含CCGG位點的片段，經Bisulfite處理和高通量測序技術進行基因組CpG富集區域內的單堿基分辨率的甲基化測序。相對WGBS而言RRBS技術作為高性價比的甲基化測序方案，測序量大幅減少，在大規模臨床樣本研究中具有很不錯的應用價值。

**預防和***的一個手段是通過去甲基化恢復某些關鍵的抑*基因或DNA修復基因的活性，目前研究**多的是DNMTs抑制劑，它通過抑制DNMT活性以逆轉異常的DNA甲基化。**個表型修飾藥物為5-azacytidine及其類似物5-aza-2'-deoxycytidine（5-aza-CdR），這類藥物已經美國FDA批準用于白血病前骨髓增生異常綜合征的***。5-aza-CdR是胞嘧啶的類似物，在DNA復制過程中可以摻入到DNA鏈中，一方面它可以降低DNA接收甲基的能力，另一方面它抑制DNMT活性，導致DNA甲基化水平的降低。體外和體內試驗均表明，5-aza-CdR具有降低超甲基化的抑*基因甲基化水平從而抑制**的能力，臨床表明應用5-aza-CdR可提高部分IV期小細胞肺*患者生存率，但該藥也存在著不可忽視的毒副作用（如特異性不強，不能針對某一特定抑*基因進行靶向***；高劑量的5-aza-CdR可能誘發**的轉移），因此其在臨床上的應用受到了很大限制。也有研究表明，低劑量的As2O3可起到***肝*的目的。ChIP-Seq 能實現真正的全基因組分析。

芯片平臺作為目前比較成熟的篩選工具，已經在很多領域有了相應的應用。多家芯片公司在DNA甲基化這塊兒有了相應的產品提供，其中應用**為***的就Agilent平臺和Illumina平臺，相應的產品包括Agilent Human CpG Island Microarray Kit，Infinium HumanMethylation27 BeadChip和Infinium HumanMethylation450K BeadChip。另外Roche NimbleGen和Affymetrix也有相應的芯片推出，但是NimbleGen的芯片今年下半年已經停產不同的芯片平臺，各自的實驗過程也是不一樣的。安捷倫前期采用的甲基化DNA免疫共沉淀（MeDIP）技術。將基因組DNA分成兩份，一份用來做 MeDIP，另一份作為對照。兩個樣品都標記熒光(富集的樣品用Cy5標記，對照用Cy3標記)，然后與芯片雜交。芯片上每個探針的Cy5/Cy3強度比例顯示出該區域的甲基化程度。850K芯片為半金標準，價格低，分析簡單，較為適合EWAS類型的課題。山東RRBSDNA甲基化活動

焦磷酸測序技術服務基于QIAGEN公司的PyroMark Q96 ID平臺。上海TBSDNA甲基化歡迎咨詢

全基因組甲基化測序（Whole Genome Bisulfite Sequencing, WGBS）是將重亞硫酸鹽Bisulfite處理和高通量測序技術相結合，對有參考基因組進行全基因組范圍的單堿基分辨率的甲基化測序，是DNA甲基化檢測的“金標準”。WGBS滿足全基因組DNA甲基化圖譜及疾病關聯分析、基因調控分析、疾病的甲基化標志物篩選等探索性課題的研究。技術優勢：DNA甲基化檢測**有力的工具，單堿基分辨率，檢測每個C堿基的甲基化狀態，全基因組范圍，**限度地獲得甲基化信息，適合所有有參考基因組的物種適合各種類型的樣本。上海TBSDNA甲基化歡迎咨詢