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寧波腦脊液外泌體分離供貨商

來源: 發布時間:2023-12-02

為了正確使用外泌體作為DDS,我們必須考慮外泌體的成分和它們的形成途徑。然后,還應描述外泌體親和力和細胞攝取的特征。外泌體載體表現出不同的目的和功能,這要歸功于外泌體作為基本的轉運體本身就具有出色的特性。這可以用于細胞靶向,也可以作為藥物的額外增強。迄今為止,ExoCarta在外泌體中發現了大約10,000種蛋白質、3500種mRNA和超過1100種不同的脂質。對于系統審查,出現了許多很棒的數據庫,例如Vesiclepedia和ExoCarta,其中描述了外泌體分離程序和來源以及已識別的載體。外泌體可作為一種疙瘩標志物進行檢測,通過其生物學特征進行診斷和治著。寧波腦脊液外泌體分離供貨商

外泌體的表征方法:根據藥物遞送系統(DDS)表征外泌體結構至關重要,因為它決定了DDS的特性,例如細胞或組織親和力、應激反應、吸收途徑和藥物釋放。2014年和2018年國際細胞外囊泡學會(MISEV2018)提出了外泌體(包括研究和外泌體制備)應滿足的基本要求指南。在開發基于外泌體的DDS時,必須考慮數量、大小、形態、膜組成和蛋白質(包括受體)等參數。這些參數表征所用的技術主要為光學、非光學和微流體技術。外泌體的表征方法之非光學方法:FTIR光譜和衰減全反射FTIR(ATR-FTIR)常用于外泌體質量量化和脂質和蛋白質含量的總體估計。使用TRPS,可以同時測量大小、濃度和zeta電位。由于掃描電子顯微鏡(SEM)、透射電子顯微鏡的成本較高,近些年來,一種新型的納米粒度分析儀器在外泌體研究領域迅速發展,比如:粒度分析儀可以不只可以進行單顆粒檢測,顆粒粒徑檢測還可以檢測細胞外泌體的濃度、zeta電位、形態等進行多維度檢測。廣州血液RNA外泌體分離多少錢外泌體通過調節免疫系統和疙瘩微環境,在疙瘩免疫治著中的作用日益受到關注。

外泌體衍生物miRNA的重要應用:miRNA是一類主要的小分子、單鏈、非編碼RNA分子,其成熟形式的長度在20到22個核苷酸(NT)之間,在幾乎所有生物途徑中發揮重要作用,包括細胞生長、增殖、分化、免疫反應,細胞凋亡,代謝和疙瘩發生。外泌體在體液中的主要作用是可以保護miRNA,防止其生物分子在非生理條件下(多次凍融循環、長期儲存和極端pH)降解。據報道,外泌體來源的miRNA在-20°C下可保持穩定長達5年,并且對凍融循環具有抵抗力.這也使外泌體成為病癥和其他疾病的潛在生物標志物。miRNA與包括病癥在內的許多疾病的發病機制有關,并且還被證明被遠端或附近的受體細胞吸收作為外泌體中的貨物,作為細胞間通訊的一種方法,可能會影響發病機制。所以,外泌體可以被看作是miRNA轉移至目標受體細胞的載體。

外泌體的表征方法之光學方法:目前,光學方法是外泌體表征的主要方法,即動態光散射(DLS)、多角度光散射(MALS)和納米粒子跟蹤分析(NTA)。這些方法允許對尺寸(DLS0.5–200nm;MALS10–500nm;NTA10–1000nm)、尺寸分布和濃度進行高分辨率測量。DLS和MALS的結合增加了測量范圍(0.5–500nm)和精度。光學方法比較受歡迎的,但缺點是靈敏度低、試劑消耗高以及需要昂貴的設備。在使用納米粒子跟蹤分析NTA方法過程中,熒光染料的加入也提高了分辨率,并允許通過使用熒光標記來表征表面免疫表型。從而確定標記物存在。外泌體受到多種因素的調控,例如細胞膜電位、氧化應激和信號轉導途徑等。

分離外泌體的方法之密度梯度超速離心:有助于根據尺寸、結構和形態差異分離和分析納米級材料。DGUC“細化”分離的囊泡,并使用密度為1.07g/mL或更低的密度梯度培養基。水中碘沙醇、冰冷的PBS和蔗糖是用于外泌體分離的常見梯度培養基。有市售的碘沙醇密度梯度分餾膜,用于將外泌體與非囊泡成分分離。將生物懸浮液添加到梯度培養基中,并以完整的梯度分層組分。DGUC有助于分離具有相同梯度的樣品。凋亡小體、蛋白質聚集體和其他非外泌體微囊泡可能通過超速離心干擾較終分離的外泌體產物。DGUC有助于克服超速離心的局限性,并提供較純凈的外泌體。DGUC在精細化和高性能外泌體分離方法中的應用。簡而言之,在分離細胞碎片后,應用1×105g用60%碘沙醇離心3小時,然后用1×10離心5用40%碘沙醇g18小時有助于形成多達12個碘沙醇梯度級分和兩個外泌體級分。超速離心使用連續的密度梯度或逐步梯度來較小化這些顆粒材料對外泌體的干擾。外泌體的高純度分離是外泌體研究的基礎。寧波腦脊液外泌體分離供貨商

分離過程中避免對外泌體結構和功能造成影響至關重要。寧波腦脊液外泌體分離供貨商

外泌體是指包含了復雜RNA和蛋白質的小膜泡(30-150nm),現今,其特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡。1983年,外泌體頭次于綿羊網織紅細胞中被發現,1987年Johnstone將其命名為“exosome”。多種細胞在正常及病理狀態下均可分泌外泌體。其主要來源于細胞內溶酶體微粒內陷形成的多囊泡體,經多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質中。所有培養的細胞類型均可分泌外泌體,且外泌體天然存在于體液中,包括血液、唾液、尿液、腦脊液和乳汁中。有關他們分泌和攝取及其組成、“運載物”和相應功能的精確分子機制剛剛開始研究。外泌體被視為特異性分泌的膜泡,參與細胞間通訊,對外泌體的研究興趣日益增長,無論是研究其功能還是了解如何將其用于微創診斷的開發。寧波腦脊液外泌體分離供貨商