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外泌體的提取分離：1、超濾離心。由于外泌體是一個大小約幾十納米的囊狀小體，大于一般蛋白質，利用不同截留相對分子質量(MWCO)的超濾膜對樣品進行選擇性分離，便可獲得外泌體。超濾離心法簡單高效，且不影響外泌體的生物活性，是提取細胞外泌體的一種新方法。2、磁珠免疫...

RNA提取濃度不高或質量不佳原因及解決辦法：1、RNA降解：可能是提取樣本本身降解，或者是在提取過程中導致的降級；應當盡可能使用新鮮樣本進行RNA提取，采集的樣本應當及時置于液氮或者-80℃冰箱凍存，并減少反復凍融。在RNA提取過程中應當使用RNase/DNa...

總RNA提取試劑是一種快速從組織細胞中提取總RNA的單相試劑。在樣品裂解過程中TRIzol能夠壓制RNA酶活性保持RNA完整性；加入氯仿后離心，RNA相將與DNA和蛋白質分離，隨后用異丙醇沉淀RNA。如果需要還可以繼續提取DNA和蛋白質。純化的總RNA可用于R...

無血清細胞凍存液是一種無血清細胞凍存液，通用于各種動物細胞株（tumour細胞和常規細胞），凍存細胞可在-80℃長期保存（>5年）。CELLSAVING配方成分明確，不含動物來源性蛋白，不含血清，可減少各類細菌、病毒和支原體等污染，保證凍存細胞的安全。細胞凍存...

外泌體(exosomes，Exos)是細胞分泌的一種膜囊泡，因其可以將供體細胞的信息通過其攜帶的蛋白質、mRNA、miRNA等傳遞到受體細胞，實現細胞之間的信息交流及物質交換，并且可以作為藥物載體轉運藥物而引起科學家的普遍關注(Fig1)。外泌體作為內源性的天...

要準備的器具：組織剪2把，有齒鑷1把，無齒鑷1把，200ml燒杯1個，培養皿1個，帶蓋廣口瓶1個，離心管、小瓶數個，滴管若干。以上物品須經嚴格高壓消毒滅菌。需配制的液體0.1％醋酸溶液。經44.48N10min高壓蒸汽滅菌(或是過濾除菌)后備用。此外還有用消毒...

外泌體的提取、分離方法：超高速離心法。常用的是超高速離心法，該方法是被譽為分離外泌體的“金標準”。該方法利用離心力從細胞培養液或生物流體獲得外泌體，經過400×g、2000×g、10000×g的低速離心，除去細胞及大的細胞分泌物；較后超高速100000×g離心...

鼠尾膠原備用膠凝程序：1）在冰上放置以下物品：膠原蛋白I、無菌10×PBS、無菌蒸餾水、無菌1MNaOH。2）確定膠原蛋白I待使用溶液所需的較終濃度的體積。3）在冰上放置無菌管以收存膠原蛋白I。4）在無菌條件下執行以下步驟。4.1加入10×PBS（終體積/10...

細胞凍存秘籍：程序1.凍存前檢查凍存前，細胞應處于指數生長期，確保細胞處于健康狀態。理想情況下，應在收獲細胞前24小時更換培養基。建議對培養物進行微生物污染物，特別是支原體的檢測，并通過適當的方法，如STR分析確定其身份。如果在培養過程中使用物品，那么建議在冷...

鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項：三維膠原的制備鼠尾膠原蛋白型在濃度1mg/ml以上，pH左右時可形成具有一定強度三維膠,建議成膠濃度1-2mg/ml。膠原蛋白溶解于0.006mol/L乙酸中，在成膠過程中需要加入0.06體積的0.1mol/LNaOH來中和...

無血清快速細胞凍存液，通用于各種動物細胞株。特別配方具有有效提高細胞凍存活率和復蘇活力。不含動物來源性蛋白，能減少各類病毒、霉菌和支原體等的污染，確保凍存細胞安全。既適用于一般培養細胞的凍存，也適用于無血清培養細胞和蛋白表達細胞的凍存。產品特色：1.高安全性，...

鼠尾膠原為貼附底物的人鼻腔纖毛上皮細胞的體外培養模式,為人鼻腔黏液纖毛運輸系統的研究提供科學有效的方法。方法制備鼠尾膠原并鋪片,以鼠尾膠原為貼附底物組織塊培養法培養人鼻腔纖毛上皮細胞,培養7天時進行HE染色及掃描電鏡和透射電鏡觀察細胞形態和結構,應用高速攝像技...

Trizol是一種總RNA抽提試劑，內含異硫氰酸胍等物質，能迅速裂解細胞，壓制細胞釋放出的核酸酶活性。目前常用Trizol法進行提取組織或細胞中的RNA。原理:在勻質化或溶解樣品中，Trizol試劑可保持RNA的完整性，同時能破壞細胞及溶解細胞成分。加入氯仿離...

細胞凍存秘籍：程序1.凍存前檢查凍存前，細胞應處于指數生長期，確保細胞處于健康狀態。理想情況下，應在收獲細胞前24小時更換培養基。建議對培養物進行微生物污染物，特別是支原體的檢測，并通過適當的方法，如STR分析確定其身份。如果在培養過程中使用物品，那么建議在冷...

無血清細胞凍存液，通用于各種動物細胞株。特別配方具有有效提高細胞凍存活率和復蘇活力。不含動物來源性蛋白，能減少各類細菌、霉菌和支原體等的污染，確保凍存細胞安全。既適用于一般培養細胞的凍存，也適用于無血清培養細胞和蛋白表達細胞的凍存。高安全性，完全使用醫藥品等級...

RNA提取試劑注意事項：1、必須戴一次性手套操作，且盡量不要對著RNA樣品說話，以防RNA酶污染。建議戴一次性口罩操作。2、TRIReagent含有毒物質苯酚，避免接觸皮膚或吸入。為防止濺入眼睛，請戴防護眼鏡或使用透明保護屏。如皮膚接觸TRIReagent，請...

拭子RNA提取試劑的選擇？應有較高的提取得率。對離心柱法而言，拭子核酸得率的高低，主要取決于離心柱對核酸的吸附能力、洗脫能力以及裂解液的裂解消化能力。離心柱的硅膠膜RNA吸附性能好、裂解液細胞裂解能力強、洗脫液洗脫能力好，核酸的提取得率就高。反之，如果離心柱硅...

安德魯·法爾稱：“克雷格和我的工作是研究為什么一些基因會停止運行，我們試圖去控制它們，我們發現了一些東西可以有效地中止它們。這些基因并不能告訴你它們能做什么，所以如果你能中止它們，你就可以開始了解它們能做什么。不過，較初發現RNA現象的是一位華人學者，非常可惜...

膠原蛋白的提取方法：酸法提取：酸法提取主要采用低離子濃度酸性條件浸漬處理原料，從而破壞分子間的鹽鍵和希夫堿，而引起纖維膨脹、溶解。作為溶劑使用的酸，主要有鹽酸或亞硫酸、磷酸、硫酸、醋酸、檸檬酸和甲酸等。酸法是提取膠原蛋白比較常用和有效的方法，用酸法提取的膠原較...

酸解提取鼠尾Ⅰ型膠原及相對分子質量和濃度檢測鼠尾肌腱在醋酸溶液的酸解作用下，其腱性組織被水解成膠凍狀溶液，從而分解成鼠尾Ⅰ型膠原蛋白分子。抽取鼠尾Ⅰ型膠原150μL滴在薄膜上，可形成液滴狀膠原蛋白凝膠(，其生物力學強度極差，一碰即散。將鼠尾膠原蛋白進行SDS-...

膠原蛋白的適用征狀：1、由于工作勞累，睡眠不足形成的皮膚晦暗無光、發黃、皮膚彈性差等皮膚衰老的不良癥狀。2、由于年齡、太陽輻射因素引起的皮膚松弛、下垂、皺紋、干燥等皮膚衰老現象。3、由于體內異常黑色素分泌旺盛，大量沉積皮膚表面，肌膚不能及時代謝出異常黑色素，形...

鼠尾膠原蛋白耗子尾汁還能變得更加，一種被稱作鼠尾膠原蛋白的“珍貴”液體就來自大鼠的尾巴，制作過程需要經歷醋酸抽提、氯化鈉沉淀和磷酸氫二鈉沉淀等步驟，才能從鼠尾中獲得珍貴的膠原蛋白。這種膠原蛋白在37℃的條件下會形成3股螺旋結構，可以用來當作細胞培養的基質。細胞...

RNA提取真正需要注意的要點：你的植物組織樣本采樣、保存正常嗎？組織裂解充分了嗎？組織起始量是否過大？起始量過大的話，他們得帶進去多少RNase呀，導致裂解液不能充分壓制內源性的RNase，失敗就在預料之中！你的細胞活性好嗎？細胞都到衰亡期了，你提什么RNA呀...

細胞培養過程中，細胞需要貼附在培養皿表面（懸浮培養細胞除外）才能完成生長過程，而有一些細胞卻總是不太給力，自己完成不了貼壁過程或者貼壁困難，這個時候鼠尾膠原蛋白就能承擔起讓細胞更容易貼壁的作用。這一步也被稱作涂層（coating），給培養皿涂上了一層膠原蛋白后...

實驗應用：鼠尾膠原在原代培養耳蝸血管紋邊緣細胞中的應用。目的：建立利用自制的鼠尾膠原培養大鼠耳蝸邊緣細胞的方法。方法:制作鼠尾膠原,并觀察利用自制的鼠尾膠原所培養出大鼠耳蝸邊緣細胞的效果。結果：自制的鼠尾膠原能正常地培養出大鼠耳蝸邊緣細胞，細胞角蛋白18表達陽...

酵母總RNA快速提取試劑盒(離心柱型)：一、原理簡介。改進的異硫氰酸胍/酚一步法裂解細胞和滅活RNA酶，然后總RNA在高離序鹽狀態下選擇性吸附于離心柱內硅基質膜，再通過一系列快速的漂洗－離心的步驟,去蛋白液和漂洗液將細胞代謝物、蛋白等雜質去除，較后低鹽的RNa...

鼠尾膠原實驗應用：探討應用鼠尾膠原在豚鼠前庭毛細胞膜片鉗實驗中的促進毛細胞貼壁效果。方法制作鼠尾膠原，觀察全細胞膜片鉗實驗中，自制的鼠尾膠原對前庭毛細胞的貼壁黏附作用。結果無鼠尾膠原時，前庭毛細胞懸浮于外液，不宜封接；有鼠尾膠原時，前庭毛細胞貼附于培養皿底壁，...

與DNA不同，RNA一般為單鏈長分子，不形成雙螺旋結構，但是很多RNA也需要通過堿基配對原則形成一定的二級結構乃至三級結構來行使生物學功能。RNA的堿基配對規則基本和DNA相同，不過除了A-U、G-C配對外，G-U也可以配對。在細胞中，根據結構功能的不同，RN...

細胞凍存，我們應該注意哪些事項：1、液氮內的細胞凍存較長時間不要超過半年，凍存在液氮中的細胞應一段時間內進行更替。一個細胞系在培養一個月后，可復蘇一管新的細胞確保其質量沒有發生太大變化，傳代幾次后，再凍存留種。2、細胞復蘇時，為保證獲得較高的存活率和接種率，應...

無血清細胞凍存液的使用方法及注意事項：1.將分裝好的細胞凍存管，直接置于-80度冰箱過夜保存，次日投入液氮中保存即可備注：1、凍存過程中，第2步在冰袋附近操作時，低溫避免保護劑對細胞造成損傷。2、細胞凍存管一定要保證完全密封，否則在復蘇過程中有可能會炸（1）提...