拭子RNA提取試劑的選擇?應有較高的提取得率。對離心柱法而言,拭子核酸得率的高低,主要取決于離心柱對核酸的吸附能力、洗脫能力以及裂解液的裂解消化能力。離心柱的硅膠膜RNA吸附性能好、裂解液細胞裂解能力強、洗脫液洗脫能力好,核酸的提取得率就高。反之,如果離心柱硅...
一種生物醫用鼠尾膠原蛋白的提取方法:1.用0.03?0.06mol/L的檸檬酸溶液溶解沉淀物,成透明澄清黏稠溶液;在冰水浴中,調節pH=6.5,用的3?6mol/L的NaCl溶液緩慢加入上清液中,不斷攪拌至溶液中白色的絮狀物不再析出,4°C沉淀10小時,去除上...
鼠尾膠原在心肌細胞氧化損傷中的保護作用:膠原蛋白具有抗氧化作用,但既往在實驗室主要將鼠尾膠原用于促進細胞貼壁和支架構建,對于其抗氧化作用目前尚無相關研究。目的:探討鼠尾膠原對過氧化氫導致離體心肌細胞氧化損傷的保護作用。方法:將原代培養的SD大鼠乳鼠心肌細胞隨機...
外泌體的提取、分離方法:聚合物沉淀法。聚合物沉淀法用于分離病毒和其他的生物大分子已有50多年歷史,近幾年,將其作為一種新的方法來分離外泌體。目前,市場已經有應用聚乙二醇(polyethyleneglycol,PEG)溶液提取外泌體的試劑盒,較常見的是Syste...
細胞凍存:取出凍存管,注明細胞名稱,代數,日期。離心后,以無菌吸管吸棄上清,不要吸到底部的細胞沉淀。將細胞沉淀與凍存液充分混勻,根據計數結果,將細胞總數調節成細胞數量為5-10*105/ml為宜。將細胞凍存懸液分裝進細胞凍存管中,一般2ml的凍存管中裝入1-1...
外泌體與免疫系統:不同的細胞來源的外泌體,包括免疫細胞(B細胞和樹突狀細胞)、病細胞、上皮細胞和間充質細胞,釋放出帶有載體的外泌體,可影響先天免疫系統和適應性免疫系統中受體細胞的增殖和各自的活性。CD4+和CD8+T細胞可直接或間接地受到外泌體的影響,刺激或壓...
可以。為了能夠高效提取細胞培養上清中的外泌體,磁珠可重復使用5次(同一樣品)。試劑盒里的緩沖液含5次提取需要的量。1mL體積以上細胞上清樣本建議進行濃縮后再回收,提取時可進行反復抽提,提高提取效率。用血液樣品進行實驗時,需要根據磁珠狀況來判斷是否能重復利用;若...
外泌體的提取方法:1、磁珠免疫法。外泌體表面有其特異性標記物(如CD63、CD9蛋白),用包被抗標記物抗體的磁珠與外泌體囊泡孵育后結合,即可將外泌體吸附并分離出來。磁珠法具有特異性高、操作簡便、不影響外泌體形態完整等優點,但是效率低,外泌體生物活性易受pH和鹽...
鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項:通過醋酸抽提、氯化鈉沉淀、磷酸氫二鈉沉淀等步驟制備的。鼠尾膠原蛋白可用于包被細胞培養器皿,培養一些在普通細胞培養器皿中不易貼壁的細胞。也可用于制備三維膠,模擬真實的生長環境,使細胞在三維環境中生長。1,在使用鼠膠原蛋白型包被...
一種基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料及其制備方法:隨著現代醫學的發展,各種醫用耗材的更新換代也是日新月異。止血材料是常見的醫療器械產品。但是現今市面上的止血材料不光存在著容易引起傷口傳染的缺點;同時還存在著容易與傷口粘附不易去除,導致傷口潰爛,或者因為粘附...
2015年,隨著精細醫學概念的提出,越來越多的人開始關注如何能做到疾病的精確診斷和治病。外泌體作為一個新型的研究熱點,由于它在體內存在的普遍性和獲取的便捷性,已經成為了疾病診斷治病的潛在有效方式,在精細醫學發展上有著光明的前景。多泡內體的腔內囊泡,要么分選進溶...
無血清細胞凍存液是一種無血清細胞凍存液,通用于各種動物細胞株(tumour細胞和常規細胞),凍存細胞可在-80℃長期保存(>5年)。CELLSAVING配方成分明確,不含動物來源性蛋白,不含血清,可減少各類細菌、病毒和支原體等污染,保證凍存細胞的安全。細胞凍存...
來源于不同的組織的外泌體不僅具有其特異性蛋白分子,而且還包含其行使功能的關鍵分子。有關外泌體分泌和攝取及其組成、“運載物”和相應功能的精確分子機制近些年剛剛開始受到關注,與外泌體相關的被pubmed收錄的文章數量和國自然基金項目中標數量逐年增長,表明國內外對外...
RNA是什么?和DNA有什么區別?RNA(核糖核酸),是存在于生bai物細胞以及部分病菌、類病菌中的遺傳信息載體。RNA由核糖核苷酸經磷酸二酯鍵縮合而成長鏈狀分子。與DNA的區別:組成的區別:1、RNA由核糖核苷酸經磷酸二酯鍵縮合而成長鏈狀分子。一個核糖核苷酸...
鼠尾膠原蛋白的提取方法:1.將黏稠的膠體溶液進行高速冷凍離心處理,收集上清液;在冰水浴中,用的3?6mol/L的NaCl溶液緩慢加入上清液中,不斷攪拌至溶液中白色的絮狀物不再析出,4°C沉淀10小時,去除上清液,絮狀溶液高速冷凍離心處理,收集沉淀2.用0.03...
外泌體(Exosomes)是細胞分泌到胞外的一種囊泡(ExtracellularVesicles,EVs),其大小為30-150nm,具有雙層膜結構和茶托狀形態,含有豐富的內含物(包括核酸、蛋白和脂質等),參與細胞間的分子傳遞。外泌體普遍存在于細胞培養上清以及...
用于外泌體提取的體液收集注意事項:1、選擇血清還是血漿?推薦大多數研究選擇血漿。血液凝固過程中血小板會產生大量外泌體,含量占血清中外泌體的50%以上,選擇血漿可避免不必要的影響。2、注意抗凝劑的選擇。肝素類抗凝劑與PCR假陰性有關,這可能是因為肝素與引物和/或...
外泌體可通過流式、WB(檢測指標有CD9,CD63,CD81)、電鏡觀察、NTA粒徑追蹤等手段檢測,普遍應用于藥物載體、疾病診斷marker、精細醫療、一些病癥治病等方面研究。由于外泌體直徑小,樣本含量低,提取十分困難。已有的外泌體分離方式有密度梯度離心、超濾...
實驗應用:鼠尾膠原為底物的人鼻腔纖毛上皮細胞培養模式的建立目的建立以鼠尾膠原為貼附底物的人鼻腔纖毛上皮細胞的體外培養模式,為人鼻腔黏液纖毛運輸系統的研究提供科學有效的方法.方法制備鼠尾膠原并鋪片,以鼠尾膠原為貼附底物組織塊培養法培養人鼻腔纖毛上皮細胞,培養7天...
外泌體表面有其特異性標記物(如CD63、CD9蛋白),用包被抗標記物抗體的磁珠與外泌體囊泡孵育后結合,即可將外泌體吸附并分離出來。磁珠法具有特異性高、操作簡便、不影響外泌體形態完整等優點,但是效率低,外泌體生物活性易受pH和鹽濃度影響,不利于下游實驗,難以普遍...
膠原蛋白的提取方法:酸法提取:酸法提取主要采用低離子濃度酸性條件浸漬處理原料,從而破壞分子間的鹽鍵和希夫堿,而引起纖維膨脹、溶解。作為溶劑使用的酸,主要有鹽酸或亞硫酸、磷酸、硫酸、醋酸、檸檬酸和甲酸等。酸法是提取膠原蛋白比較常用和有效的方法,用酸法提取的膠原較...
鼠尾膠原:鼠尾膠原是一種天然培養基和一種天然的黏附劑。實驗設備及材料:大鼠尾巴、剪刀、鑷子、止血鉗、彎頭吸管、平皿、三角燒瓶、燒杯、量筒、天平、生理鹽水、75%酒精、0.1%醋酸溶液、蓋玻片、培養瓶、鉆石筆、鼠尾膠原。實驗內容:1、制備鼠尾膠原(兩個同學一組操...
膠原蛋白占人體蛋白質總量的三分之一,不論來源于哪一種動物或哪一種組織的膠原都有許多共同特性。膠原蛋白可分為20幾個亞型,但為常見的為I、II、III型膠原蛋白,即間質膠原蛋白。其中I型為豐富且品質優良。劃重點:任何動物的膠原都有許多共性,I型膠原蛋白為豐富且品...
通用多糖多酚植物RNA提取試劑盒:1、多糖多酚植物RNA提取試劑盒整合了在提取過程中去除干擾物的技術,已成功用于葡萄,中草藥等多糖含量高的樣品,成功用于棉花等多酚含量高的樣品。另外華越洋還開發了糖類清理劑,PCR壓制物清理劑,核酸提取優化劑,樣品核酸穩定劑,R...
鼠尾膠原實驗應用:鼠尾膠原在原代培養耳蝸血管紋邊緣細胞中的應用。目的:建立利用自制的鼠尾膠原培養大鼠耳蝸邊緣細胞的方法。方法:制作鼠尾膠原,并觀察利用自制的鼠尾膠原所培養出大鼠耳蝸邊緣細胞的效果。結果:自制的鼠尾膠原能正常地培養出大鼠耳蝸邊緣細胞,細胞角蛋白1...
一種基于鼠尾膠原蛋白:1.一種基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料,為鼠尾膠原蛋白、聚乙烯醇、殼聚糖、水制成的凍干止血材料,各材料重量配比為鼠尾膠原蛋白聚乙烯醇殼聚糖為1-10%0.2-5%0.2-2%,余量為水。2.根據權利要求1所述的基于鼠尾膠原蛋白制備的...
鼠尾膠原是一種天然培養基,它具有促進體外培養細胞(特別是上皮細胞)貼壁的作用,同時它也是一種天然的黏附劑,當我們需要在培養瓶或培養皿內放置小玻片,制備細胞爬片時,可在瓶底涂一層膠原,再放上小玻片,自然干燥后小玻片就固定于培養瓶之中。通過本實驗可掌握鼠尾膠原的制...
組成性非編碼RNA。tRNA是具有復雜的倒“L”型的多功能小分子,他的主要功能是活化專一的氨基酸并攜帶氨基酸參與蛋白質生物合成。隨著科技進步,人們可以設計生產出一種tRNA類似物,創造了新的生物技術的應用。(1)tRNA類似物。可利用非天然的tRNA類似物作為...
動物細胞RNA提取:1、懸浮細胞:可直接離心后棄掉培養基,用無菌PBS清洗1~2遍后,再用適量PBS懸浮起來,然后再加入裂解液進行裂解。千萬不要完全棄掉液體后,往沉淀細胞里直接加入裂解液,這樣會使外表層的細胞裂解后釋放的組蛋白包裹粘附在沉淀細胞外側,從而限制沉...
一種基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料及其制備方法并在說明書中給出了原因:“一般的生物體中提取的膠原蛋白多為混合型,之前多從牛皮、豬皮、牛腱中提取,但這類膠原蛋白不僅有油脂等其他雜質,也存在著II型及其他一些膠原蛋白亞型;同時,這種畜牧業大量飼養的動物存在著...