原代細胞是出了名的難養,對培養環境和實驗操作的要求更苛刻。原代細胞在體外通常只能傳代少數幾次,某些原代細胞(如神經元細胞)甚至無法進行傳代。對于研究人員來說,如何才能經濟高效地培養好原代細胞,并圍繞這有限幾次傳代的細胞設計實驗,是更大的一個挑戰。原...
不能用手觸及已消毒器皿瓶口、瓶塞內部,吸管前部等所有可能與細胞接觸的部分,如已接觸,要用火焰燒灼消毒或取備品更換。開啟、關閉長有細胞的培養瓶時,火焰滅菌時間要短。防止因溫度過高燒死細胞。換液時傾倒廢液,瓶口不能接觸廢液缸,速度不能過快,防止廢液四濺...
CRISPR基因敲除穩定細胞株構建服務:隨著TALEN和Cas9/gRNA基因敲除系統的出現,基因定點敲除的難度大幅下降。全新的技術將基因敲除從價格高昂,耗時漫長的ZNF系統,逐漸變成簡便的研究工具?,F在我們可提供Talen和Cas9/gRNA兩個系統的基因敲...
這篇研究報告中,研究人員將四種類型人類細胞注射到小鼠的大腦中,包括間質干細胞,對于每一種類型的細胞而言,研究人員共能注射30萬個細胞。隨后研究人員利用MRI來追蹤在兩周內所發現的注射細胞群體。結果發現,間充質干細胞的MRI信號要比其它三種注射的細胞類型高出大約...
簡單的可以這么認為,就是說呢,生長因子進入人體以后,它不光刺激普通的細胞,它也刺激一種細胞,演變為分泌細胞,而且這個分泌細胞又可以分泌生長因子,所以它會源源不斷的造成生長因子產生,刺激到組織的生長。但是這只是一種理論上的推測啊。不過它能更好的解釋打...
疫區來源的胎牛血清受制于血源地和集血技術,很多都攜帶有生物學污染,如支原體、噬菌體、病毒、原蟲等。這對實驗室和操作人員的安全是重大的隱患,對全國廣大人民**也是不容忽視的潛在危險!國內官方對這方面有明確解答(以下摘自查處非法入境胎牛血清的官方公告):“未經檢疫...
肝臟原位灌注法:(為分離肝細胞的經典方法)1,在38度-39度的水浴槽中預熱hepes緩沖液和膠原酶液,使其在肝內達到37度。2,給大鼠(180-200g)腹腔注射巴比妥鈉100ul/100g,從古靜脈注射肝素1000u,打開腹腔,在門靜脈的肝外5...
成纖維細胞培養基是專門為正常人類成纖維細胞體外培養設計的*適于其生長的培養基。它是經滅菌的液體培養基,包含必需和非必需氨基酸、維生素、有機和無機化合物、激su、生長因子、微量礦物質和低濃度胎牛血清(2%)。該培養基緩沖體系為HEPES和重碳酸鹽,在含5%CO2...
原代培養就是提取的細胞體外次培養。,當原代培養成功以后,隨著培養時間的延長和細胞不斷分裂,一則細胞之間相互接觸而發生接觸性抑制,生長速度減慢甚至停止;另一方面也會因營養物不足和代謝物積累而不利于生長或發生中毒。此時就需要將培養物分割成小的部分,重新接種到另外的...
胎牛血清是一種外觀呈黃色無溶血無異物,粘稠的液體,它取自于剖腹產的胎牛,胎牛血清品質是比較高的,因為他沒有接觸到外界,血清中所含有的抗體補體對細胞有害成分也比較少。它能夠維持細胞指數的正常生長素,提供蛋白質,識別維生素之類,有些情況下結合蛋白質能與有毒金屬和熱...
胎牛血清儲存:-10℃,避光 恒溫冰箱;運輸:干冰。高質量澳大利亞胎牛血清和小牛血清現貨供應——牛血清由于包含豐富的營養成分,通常被添加到細胞培養液中,用于促進和維持脊椎動物、哺乳動物、昆蟲及其他物種細胞的生長。牛血清的來源地很多,其中澳大利亞來源的牛血清被公...
原代肝細胞培養基由補充了適當的生長因子和細胞因子的基礎培養基組成。細胞在細胞培養箱中生長并維持在適當的溫度和混合氣體中(對于哺乳動物細胞,通常為37°C,5%CO2)。培養條件根據細胞類型而廣變化。生長培養基的pH,葡萄糖濃度,生長因子和其他營養物質的存在...
Autotaxin(ATX)是一種分泌型溶血磷脂酶D,可催化溶血磷脂酰膽堿(LPC)水解為溶血磷脂酸(LPA),這是一種多效性生長因子樣磷脂。LPA通過其G蛋白偶聯受體(GPCRs;LPAR1-6)在幾乎所有細胞類型中具有多種作用,表現出重疊的特異...
細胞培養可分為原代培養和傳代培養。直接從體內獲取的組織細胞進行培養為原代培養;當原代培養的細胞增殖達到一定密度后,則需要做再培養,即將培養的細胞分散后,從一個容器以1:2或其他比率轉移到另一個或幾個容器中擴大培養,為傳代培養,傳代培養的累積次數就是...
干細胞鑒別方法:盡管許多組織中都存在干細胞,但其數量很少,而且在顯微鏡下時,無法將它們與這些組織中的其他細胞清楚區分。因此,如何找到一種簡單有效的方法,科學、準確地區分這類稀少的細胞,一直是科學家們不斷探索的課題。過去人們普遍采用的干細胞鑒別方法主要有以下兩種...
細胞培養是生物學和醫學研究常用的手段之一,可分為原代培養和傳代培養兩種。原代培養是直接從生物體獲取組織或的一部分進行培養,也稱初代培養。嚴格地說即從體內取出組織接種培養到次傳代階段,但實際上,通常把代至第十代以內的培養細胞統稱為原代細胞培養。一般持...
這篇研究報告中,研究人員將四種類型人類細胞注射到小鼠的大腦中,包括間質干細胞,對于每一種類型的細胞而言,研究人員共能注射30萬個細胞。隨后研究人員利用MRI來追蹤在兩周內所發現的注射細胞群體。結果發現,間充質干細胞的MRI信號要比其它三種注射的細胞類型高出大約...
細胞株是培養十代以內的細胞,細胞系是培養50代以內的細胞,而腫瘤細胞,可以簡單的理解為病細胞。那么請看生物必修一然后一章:病細胞是正常細胞的原病基因或者抑病基因發生突變產生的可以無限增殖,表面糖蛋白減少易轉移的一類細胞。注意:只要細胞原病基因或者抑病基因發生突...
慢病毒染上目的細胞:通過上述實驗確定了慢病毒染上目的細胞的比較好MOI,接下來就可以進行穩定細胞株的篩選工作了。將目的細胞接種24孔板,控制好細胞密度,貼壁后大約為30%-40%左右的密度;細胞過夜培養后,按比較好MOI加入病毒,同時加入終濃度為8μg/mlp...
現在您知道了如何傳代細胞,讓我們再來看看傳代的一些不同應用。前面已經提到,人胚胎干細胞是一類必須傳代的細胞。它們通常與小鼠成纖維細胞MEF共培養,后者能提供幫助干細胞保持其多能性的因子。生長于飼養細胞上的干細胞到了合適的發育階段時需挑出來。可用微型...
常見細胞株:4179長尾綠猴胚胎細胞;4647長尾綠猴腎細胞ATCC細胞;351雜交瘤細胞抗;CD23A0人卵巢ai細胞;A2780細胞[人卵巢ai細胞]ATCC細胞;3T3小鼠胚胎瘤成纖維細胞;3T3-E1鼠胚成骨細胞;3T3-L1小鼠脂肪細胞;3T3-Sw...
細胞培養可分為原代培養和傳代培養。直接從體內獲取的組織細胞進行培養為原代培養;當原代培養的細胞增殖達到一定密度后,則需要做再培養,即將培養的細胞分散后,從一個容器以1:2或其他比率轉移到另一個或幾個容器中擴大培養,為傳代培養,傳代培養的累積次數就是...
細胞一般儲存在液氮中,溫度達-196℃,理論上儲存時間是無限的。細胞凍存及復蘇的基本原則是慢凍快融,實驗證明這樣可以比較大限度的保存細胞活力。細胞復蘇就是要把原本冷凍保存(凍存)著的細胞恢復到一般的生長狀態,現在我們來看看原代細胞的復蘇步驟。一、檢...
傳代培養的細胞是細胞系;細胞株就是從細胞系篩選出來的有特殊屬性的比如無線增值的。細胞株(CellStrain):通過選擇法或克隆形成法從原代培養物或細胞系中獲得具有特殊性質或標志物的培養物稱為細胞株(CellStrain),也就是說,細胞株是用單細胞分離培養或...
零售EGF產品的主要障礙是它們的貨架期過短。在適當的儲存條件下,平均3個月的穩定期使EGF制劑不適合大規模的商業批量使用。在室溫下存放一周對EGF的穩定性影響不大,但產品的長期穩定性需要溫度監控。冷藏的儲存方式可以將保質期從1個月延長到3個月。若果該產品在冷凍...
原代肝細胞屬于高度分化的細胞,對體外培養條件的要求比傳代細胞高,其在體外存活時間也比傳代細胞短,采用單層膠原培養法進行體外培養的原代肝細胞存活時間為1周左右[25]。本實驗是在Seglen兩步灌流法的基礎上進行改進,結合逆向灌流、多次低速離心等方法成功分離獲取...
是一種可對DNA染色的細胞核染色試劑,常用于細胞凋亡檢測。碘化丙啶是一種核酸染料呈紅色,它不能透過完整的細胞膜,但凋亡中晚期的細胞和壞死細胞由于細胞通透性的增加,PI能夠透過細胞膜而使細胞核染紅,用PI 單一染色觀測培養細胞,只能表示細胞的壞死情況,而不是...
營養豐富的培養基是維持細胞活性及高密度生長的基礎,營養缺乏容易引起細胞凋亡,新生牛血清中所含大部分營養成分可以通過化學成分明確的營養物質如氨基酸維生素等成分組合取代。低血清培養基營養成分大優于基礎培養基,只需添加1%~5%新生牛血清,而對細胞生長、...
科學家們在經過長期的探索和努力之后,較終把目光落在干細胞上,生命體是通過干細胞的分裂來實現細胞更新及保證持續增長,干細胞的研究與應用將有可能使人類實現完美修復損傷組織和器臟的夢想。多年來科學家們一直致力于尋找利用干細胞的復制和分化來取代受損細胞或組織的方法。這...
這項研究中,研究者Bulte及其同事發現,這些間充質干細胞含有高水平的甘露糖(mannose),其與葡萄糖相似,且能利用基于MRI的標準成像方法輕松成功地被發現;研究者表示,特定的腫瘤細胞會失去大量糖分子,這或許就能被MRI機器很容易就檢測到,此后研究人員便有...