轉膜液

產品簡介：

我們生產的Western轉膜液(Western Transfer Buffer)可以用于Western時濕法電轉膜，是一種快速效率高的特有配方轉膜液，效果較好。

1、轉印快速——室溫轉膜，20-30 分鐘內將蛋白轉移到印跡膜上。

2、轉印效率高——產生熱量非常小，減少蛋白損失。

配置靈活——配置1*轉膜液時加入無水甲醇、無水乙醇均可，效果沒有明顯差異，兼容性好。

使用方法：

 1* 快速轉膜液的配制(1000 ml)：

 取100ml 此產品+800 ml 去離子水+100ml甲醇。

電轉儀的設置：

一個轉印槽：電壓：110V,  電流：400mA；

二個轉印槽：電壓：140V，電流：700mA；

100kD 以下蛋白，膠濃度＜10%的，轉印時間20分鐘即可轉印完畢。

100kD 以上蛋白，膠濃度≥10%的，轉印時間30分鐘即可轉印完畢。 細胞分裂的前期，明顯的變化是細胞核中出現染色體。成纖維細胞增殖試劑盒

抗體稀釋參考一抗稀釋范圍為1mg/mL原液1：1000-1:5000或0.2-1.0µg/mL，二抗稀釋范圍為1mg/mL原液1:2000-1:10000或10-50ng/mL注意事項 1.為獲得比較好效果,在孵育步驟請使用搖床;  2.將Tween20(終濃度0.05-0.1%)加入封閉緩沖液和稀釋的抗體溶液,以降低非特異信號;  3.不要使用疊氮鈉作為緩沖液的防腐劑,疊氨鈉是HRP的***物;  4.避免手與膜直接接觸,實驗過程應戴手套或使用干凈的鑷子;  5.所有設備必須清潔且不沾染外來物質,金屬器械(如剪刀)不得具有可見的銹跡,銹跡可能導致斑點形成和高背景。武漢mts細胞增殖染色細胞增殖的方式有哪些？

Q：在做刺激實驗時，對測定是否有影響？

A：如果有還原性，則會與CCK-8發生反應，影響吸光度；金屬離子的存在可能會影響CCK-8的靈敏度。終濃度為1 mM 的氯化亞鉛、氯化鐵、硫酸銅會5% 、15% 、90%的顯色反應，使靈敏度降低。如果終濃度是10 mM 的話。

Q：如果吸光度值太低，可以采取什么辦法？

A：適當增加細胞數量或延長加入CCK-8溶液后的孵育時間。

Q：如果吸光度值太高，可以采取什么辦法？

A：適當減少細胞數量（建議正式實驗前優化細胞數量與熒光值之間的關系）或縮短加入CCK-8溶液后的孵育時間。

RIPA細胞裂解液

RIPA裂解液是較可靠的緩沖液之一，其主要成分含1% NP-40, 0.5% Sodium deoxycholate, 0.1% SDS，該緩沖液能夠從細胞質，膜和**白質中提取蛋白質，并且與許 多應用相容，包括蛋白質分析，和蛋白質純化。RIPA緩沖液不含蛋白酶或磷酸酶，如果需要，可將酶添加到試劑中以防止蛋白質水解并維持蛋白質 的磷酸化狀態。一些蛋白激酶和其他酶可能對RIPA緩沖液的組分敏感，導致其活性降低。 在這種情況下，準備不含脫氧膽酸鈉和SDS的RIPA緩沖液。

注意事項：

1.抽提蛋白的所有步驟都需在冰上或4℃進行。

2.裂解得到的蛋白樣品，含有較高濃度的去垢劑，不建議用Bradford 法測定蛋白濃度，可以選用BCA蛋白定量試劑盒測定蛋白濃度。

3.裂解產物中經常會出現一小團透明膠狀物，屬正常現象。該透明膠狀物為含有基因組DNA等的復合物。在不檢測和基因組DNA結合特別緊密的蛋白的情況下，可以直接離心取上清用于后續實驗；如果需要檢測和基因組結合特別緊密的蛋白，則可以通過超聲處理打碎打散該透明膠狀物，隨后離心取上清用于后續實驗。如果檢測一些常見的轉錄因子，例如NFKB、p53等時，通常不必進行超聲處理，就可以檢測到這些轉錄因子。 細胞增殖的技術難點。

超敏ECL發光底物（試劑盒）

圖像獲取

  1. 將包在塑料紙(膜)中的印跡膜置于膠片暗盒中，蛋白質面朝上，除適用于膠片曝光的燈(如紅色安全燈)之外，關閉所有燈;

  注: 膠片必須在曝光期間保持干燥,為獲得比較好效果,采取以下措施:

  確保將多余的底物溶液從膜和塑料紙上完全去除;

  在整個膠片處理期間,使用手套;

  切莫將印記膜置于已顯影的膠片上,因為膠片上的化學物質會減弱信號。

  2. 將X光膠片置于膜的上面。建議***次曝光60秒。之后可調整曝光時間以達到比較好結果。化學發光反應在底物孵育后的前5-30分鐘期間是**強烈的,這一反應可以持續幾個小時,但強度會隨時間下降,如有底物孵育后較長時間后曝光,曝光時間可能需要延長以獲得較強信號。如果使用磷光存儲成像設備(如Bio-Rad的分子成像儀系統)或CCD照相機可能需要較長的曝光時間;

  3. 使用合適的顯影劑和定影劑對膠片進行顯影。如果信號太強,則縮短曝光時間或將印記膜進行剝離并降低抗體濃度重新檢測。

CCK-8法的重復性優于MTT 法。成纖維細胞增殖試劑盒

耗材

1000ul 藍色袋裝移液頭

通用性移液器吸嘴特點：

1、采用***聚丙烯材質

2、吸附液體時低殘留、低吸附

3、無DNA酶、RNA酶和熱原

4、吸嘴尾部呈柔軟彈性椎體，配適大多數品牌移液器

5、創新超長設計，減少移液器帶來的污染200ul 黃色袋裝移液頭

通用性移液器吸嘴特點：

1、采用***聚丙烯材質

2、吸附液體時低殘留、低吸附

3、無DNA酶、RNA酶和熱原

4、吸嘴尾部呈柔軟彈性椎體，配適大多數品牌移液器

5、創新超長設計，減少移液器帶來的污染10ul 透明袋裝移液頭

通用性移液器吸嘴特點：

1、采用***聚丙烯材質

2、吸附液體時低殘留、低吸附

3、無DNA酶、RNA酶和熱原

4、吸嘴尾部呈柔軟彈性椎體，配適大多數品牌移液器

5、創新超長設計，減少移液器帶來的污染 成纖維細胞增殖試劑盒

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