在做一些***毒性試驗時，比如做鐵死亡途徑時，我們加入一個***叫C1，這個時候就需要提前換液，其實我們試過，還是會有一些影響。所以這時我們用中性紅檢測。我們實驗室，通常會用20%的硫酸銅溶液放到細胞孵箱下層，預防******。理應說，硫酸銅分子在水溶液中是硫酸根離子和銅離子，是不會揮發的。但是每次只要是新換的硫酸銅溶液再做CCK-8，結果總是不好，我也不知道是什么原因。之前在我們實驗室有發生過這樣的事情，這種有深有淺的才是該有的結果。我想說的是在有能力選擇范圍內，盡量選擇好一點的試劑，免得浪費時間。酚紅和血清對CCK法的檢測不會造成干擾；北京cck8測細胞活性加的量
CCK-8的原理
所以粗略的可以認為生成的甲瓚物的顏色的深淺與活細胞的數量成正比。為什么是粗略的呢，因為這里沒有考慮到細胞代謝水平的高低，有些細胞在***處理后，可能活細胞數不變，但是代謝率低了以后，細胞呼吸減弱，NAD+產生減少，測出的Formazan也會減少，所以此時怎么算呢（此時我就比較懷戀中性紅了）？當然也有解決的辦法，下期給大家介紹。因此可利用這個原理進行細胞增殖和毒性分析，在吸光度為450時檢測讀數。用途及常用的公 北京cck8測細胞活性加的量不同的種板數對檢測***的IC50影響大嗎？
細菌***對CCK8檢測的影響：我們做***的，經常會做到細菌或***對細胞的影響。那這種情況下我們應該怎么辦。其實細菌防御系統還是非常強大，單獨和CCK-8在一起孵育時，不會發生還原反應，幾乎不會和細菌發生顯色反應。而細菌不需要入胞繁殖，所以結果還是可信的。**討厭的就是***，我不知道有多少人是做***的。***是需要入胞繁殖的，而且需要借助細胞的東西來進行繁殖。繁殖過程中就需要消耗宿主的能量，會產生氧化還原反應，所以我用CCK-8來測定***對細胞活性的影響或者某個***對***復制的影響時，我都小心翼翼的測很多個時間點，說實話，效果不是很好。所以我比較喜歡中性紅。
貼壁生長的時間我一般就直接讓它貼壁長24h了，這個時間細胞已經貼壁完全，而且這樣設置時間對自己安排實驗時間也方便。沒人愿意大半夜爬起來做實驗吧。3、加藥后的孵育時間，我的實驗摸了3個時間，24h，48h，72h。然后根據數據的穩定性（RSD）、OD值的范圍（1.0左右）這些來選擇比較好的時間。太長了就沒有必要了，細胞呆在孔里幾天不換液結果可想而知了。4、CCK8試劑加入量，說明書中明確寫出建議加入量為培養基體積的10%。這里有一個問題：假設我要孔內是200微升的體系，即細胞懸液+藥液+CCK8=200微升呢，還是細胞懸液+藥液=200微升，cck8不算在體系內呢。關于這一點文獻報道不一致。本人**終采用的是后者。那它的用途也就大致可以猜到，和細胞增殖、細胞毒性相關的實驗都可以。
氧化還原試劑對CCK8測定的影響：CCK8是一個氧化還原反應實驗，在整個操作當中，如果有氧化還原試劑都會影響**終的結果。當有還原性物質存在時會影響CCK8的測定，增加OD值。在有氧化性物質存在時會***測定反應的發生，減少OD值。在高中化學我們就知道金屬是氧化還原反應中的重要參與者。各個公司都會告訴你：“終濃度為1mM的氯化亞鉛、氯化鐵、硫酸銅會***5%、15%、90%的顯色反應，使靈敏度降低。如果終濃度是10mM的話，將會*****。”我**開始看到這句話時很懵，因為不知道在操作中怎樣會遇到這種情況。下面就分享我能想到或者在操作中真實遇到的。用酶標儀測定在450nm處的吸光度。北京cck8測細胞活性加的量
CCK-8的英文全稱是Cell Counting Kit-8，也就是進行細胞計數的一個盒子。北京cck8測細胞活性加的量
CCK-8的用途1.細胞增殖測定：細胞增殖實驗在很多領域都會用到，比如**相關、損傷后修復等。2.***篩選：在測定一個***的毒性和安全有效濃度時，經常會用到CCK-8。3.細胞毒性測定：這個可以和各個處理因素對細胞活性和增殖的影響，比如在UV、低氧或者什么化學物品對細胞的影響上。4.**藥敏試驗：這個是用的比較廣的，我見過做**的團隊，買CCK-8都是一整箱，一整箱的買，比如果子老師所在的團隊，哈哈哈。5.微生物對細胞的毒性或增殖的實驗北京cck8測細胞活性加的量
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