RNA-Seq,是基于新一代測序技術的轉錄組學研究方法:首先提取生物樣品的全部轉錄的RNA并進行mRNA富集,然后反轉錄為cDNA后進行的新一代高通量測序,在此基礎上進行片段的拼接組裝,從而可得到一個個的轉錄本,進而可以形成對該生物樣品當前發育狀態的基因表達狀況的全局了解。不同階段或部位的生物樣品的RNA-Seq轉錄組進行比較分析,則可以在轉錄層面得到基因表達水平的變化,針對關鍵基因則可以進行代謝通路(Pathway)的構建。轉錄組學即特定細胞在某一功能狀態下轉錄出來的所有RNA的總和,包括mRNA和非編碼RNA。基于高通量測序平臺的轉錄組學測序技術能夠全方面獲得物種特定組織的轉錄本信息。廣東全轉錄學組檢測多少錢
宏轉錄學組的概念:宏轉錄組是特定時期、環境樣本、組織樣本中所有的微生物的RNA(轉錄本)的匯合。通過對這些轉錄本進行大規模高通量測序,可以直接獲得環境中可培養和不可培養的微生物轉錄組信息。這種技術不只具有宏基因組技術的全部優點,可以檢測環境中的活性微生物、活性轉錄本以及活性功能進行研究,還可以比較不同環境下的差異表達基因和差異功能途徑,揭示微生物在不同環境壓力下的適應機制,探索環境與微生物之間的互作機理。廣東全長轉錄學組分析研究轉錄組學可以直接測定每個轉錄本單核苷酸分辨率的準確度。
RNA-Seq轉錄組學技術優勢:RNA-seq技術可以檢測到低水平表達、未識別的轉錄子和新拼接亞型基因。另一方面,與基因芯片相比,RNA-Seq有一個更廣的檢測動態范圍,可以研究編碼和非編碼RNA,更易于基因網絡的構建、發現選擇性剪切轉錄物,檢測到等位基因的具體表達方式,也可以用來提取基因型信息。在RNA-Seq單細胞研究中,一個主要優勢是可以分析整個轉錄序列,而不是有限制數量的基因,并且,研究DNA和RNA的方法并不是相互排斥的,他們可以相互結合使用,產生更多的生物學上重要的信息。
普通轉錄組學測序適用于哪些情況?普通轉錄組測序主要適用于兩大類:一是不同的生長階段或者發育過程;二是不同的環境、藥物、病原菌等逆境脅迫處理。轉錄組學測序必須做生物學重復么?需要幾個重復?生物學重復是生物實驗所必須的,轉錄組測序也不例外,至少3次生物學重復。準備生物重復樣品時,通過對實驗的預先設計和控制,盡可能將與實驗處理無關的背景條件控制在同一水平,減少批次效應對結果的影響。轉錄組學測序可以同時測到mRNA、lncRNA、micRNA以及circRNA么?我們通常所講的轉錄組測序只能測到mRNA。但是全轉錄組測序通過構建兩個測序文庫(一是小RNA測序文庫、二是lncRNA測序文庫)是可以測到以上4種RNA的。轉錄組學是研究細胞表型和功能的一個重要手段。
轉錄組學:轉錄組學是研究特定的細胞、組織或個體在特定時間和狀態下所轉錄出所有RNA的學科,轉錄組測序是指利用高通量測序方法,研究特定的細胞、組織或個體在特定時間和狀態下所轉錄出的所有mRNA,用于揭示不同功能狀態下的基因表達、結構的差異,闡明分子機制。應用領域:醫學研究:疾病標志物篩查、疾病的診斷和分型、疾病復發診斷、病因與病理機制探究、臨床療效評價、藥物毒理學評價。生命科學研究:非生物環境關系研究、植物與微生物、在表型鑒定中的應用、代謝途徑及功能基因組研究、藥用植物研究中的應用。轉錄組學測序必須做生物學重復么?廣東全轉錄學組檢測多少錢
轉錄組學檢測范圍廣,高于6個數量級的動態檢測范圍。廣東全轉錄學組檢測多少錢
轉錄組學技術路線及研究意義:轉錄組測序的研究對象為特定細胞在某一功能狀態下所能轉錄出來的所有RNA的總和,包括mRNA和非編碼RNA。相對于傳統的芯片雜交平臺,轉錄組測序無需預先針對已知序列設計探針,即可對任意物種的整體轉錄活動進行檢測,提供更準確的數字化信號,更高的檢測通量以及更普遍的檢測范圍,是目前深入研究轉錄組復雜性的強大工具。基于高通量測序平臺的轉錄組測序技術能夠全方面獲得物種特定組織的轉錄本信息,從而進行基因表達水平研究、新轉錄本發現研究、轉錄本結構變異研究等。廣東全轉錄學組檢測多少錢
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