蛋白質組學在醫學的研究應用:蛋白質組學(Proteomics)是研究細胞、組織或生物體中蛋白質組成、定位、變化及其相互作用規律的科學。labelfree-非標定量法分析技術方法:非標定量法[Labelfree]是近年來重要的質譜定量方法,通過比較質譜分析次數或質譜峰強度,分析不同來源樣品蛋白的數量變化。蛋白質非標記定量技術(LabelFree)是通過液質聯用技術對蛋白質酶解肽段進行質譜分析,無需使用昂貴的穩定同位素標簽做內部標準,只需分析大規模鑒定蛋白質時所產生的質譜數據,比較不同樣品中相應肽段的信號強度,從而對肽段對應的蛋白質進行相對定量。蛋白質組學的研究方法將出現多種技術并存。江蘇定量乙酰化蛋白質組學檢測價格
蛋白組學樣本要求:常規組織:(心、肝、脾、肺、腎、腸、腦、肌肉等)PBS洗滌去除殘留血液和污染物,剔除無關的干擾組織(血管、脂肪、結締組織等);沖洗干凈,用組織剪或手術刀將組織分離成1cm3左右的小塊;液氮速凍5min,保存于-80℃。軟骨組織:PBS洗滌去除殘留血液和污染物;用手術刀將軟骨切成1cm3左右的小塊;液氮速凍5min,保存于-80℃。軟體動物(吸蟲等)PBS洗滌去除來自宿主的污染;液氮速凍5min,保存于-80℃。蛋白質組的研究不但能為生命活動規律提供物質基礎,也能為眾多種疾病機理的闡明及攻克提供理論根據和解決途徑。武漢PRM靶向定量蛋白質組學鑒定蛋白質組學在醫療和健康方面有什么應用?
定量蛋白質組學分析:特點:(1)不同樣本標記之后混樣,統一處理上機,減少了分別上機造成的實驗誤差,并利用同位素標簽的豐度來檢測,定量更準確,重復性更好;(2)由于需要標記試劑標記,因此成本相對較高;(3)通量高,在一次實驗中比較多可同時比較8個樣品;(4)利用基于同一個參考樣品的辦法,可以進行多于8個樣品的定量比較;(5)iTRAQ的覆蓋度高、靈敏度高。Label-Free定量蛋白質組學分析:Label-Free定量,即非標記的定量蛋白質組學,不需要對比較樣本做特定標記處理,只需要比較特定肽段/蛋白在不同樣品間的色譜質譜響應信號便可得到樣品間蛋白表達量的變化,通常用于分析大規模蛋白鑒定和定量時所產生的質譜數據。
PRM靶向蛋白質組學:產品分類:a.相對定量(目的同WB)。b.一定定量(目的同Elisa)。技術優勢:(1)無需抗體,可直接對樣本中目標蛋白質進行定量分析。(2)高特異性、準確度和靈敏度,靶向檢測目標蛋白對應的多個unique肽段。(3)通量高,可以同時實現幾十個蛋白的定量檢測。樣本要求:動物及臨床組織標本100mg/sample,血清、血漿200μL/sample,細胞、微生物1×107cells/sample。應用方向:驗證修飾和非修飾定量蛋白組學結果;目標蛋白相對定量和一定定量分析。蛋白質組學屬于后基因組時代的科學研究,針對基因表達產物進行檢測與定量。對人類而言,蛋白質組學的研究終究要服務于人類的健康。
蛋白質組學發展趨勢:1、基礎研究方面:近兩年來蛋白質組研究技術已被應用到各種生命科學領域,如細胞生物學、神經生物學等。在研究對象上,覆蓋了原核微生物、真核微生物、植物和動物等范圍,涉及到各種重要的生物學現象,如信號轉導、細胞分化、蛋白質折疊等等。在未來的發展中,蛋白質組學的研究領域將更加普遍。2、應用研究方面:蛋白質組學將成為尋找疾病分子標記和藥物靶標比較有效的方法之一。在對早老性癡呆等人類重大疾病的臨床診斷和治理方面蛋白質組技術也有十分誘人的前景,目前國際上許多大型藥物公司正投入大量的人力和物力進行蛋白質組學方面的應用性研究。定量蛋白質組學是蛋白質組研究的重要內容。杭州4D定量蛋白質組學質譜分析
定量蛋白質組學技術主要分為標記(label)和非標記(label free)定量策略。江蘇定量乙酰化蛋白質組學檢測價格
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