轉錄組是特定發育階段或生理條件下細胞內的完整轉錄信息的匯合,表示了基因表達的中間狀態。轉錄組測序可以對所有轉錄物進行分類、確定基因的轉錄結構、量化轉錄物的表達水平。蛋白質是生命功能的直接執行者,蛋白組是一種細胞乃至一種生物所表達的全部蛋白質。整合轉錄組學和蛋白質組學的表達數據對生物樣本進行研究,可以從整體上解釋生物學問題,探究生物體生理和疾病機理等。轉錄組學應用于胃腸瘤發生機制研究:利用轉錄組學可檢測瘤細胞惡化過程中的RNA(編碼RNA及非編碼RNA)的變化,有助于更好地理解胃腸瘤的發生機制。基于高通量測序平臺的轉錄組學測序技術能夠全方面獲得物種特定組織的轉錄本信息。南京mRNA-seq轉錄組學方法
全轉錄組學測序技術優勢:文庫優化:針對不同長度的序列采用兩種文庫構建方法,采用去核糖體的鏈特異性文庫可以獲得mRNA、lncRNA和circRNA的序列信息。數據全:全轉錄組測序完成后可獲取4類主要RNA(miRNA,mRNA,lncRNA,circRNA)數據,可對這些數據進行標準分析及整合分析。關聯全:通過對mRNA/miRNA/lncRNA/circRN序列測定及后續分析,深入開展全轉錄組調控網絡(ceRNA網絡)分析。樣本類型:細胞,組織,體液、血清、血漿、全血,總RNA等。建議總RNA起始量:>15μg,濃度≥200ng/μL)。濟南單細胞轉錄組學分析研究轉錄組學測序可以同時測到mRNA、lncRNA、micRNA以及circRNA么?
轉錄組學測序有什么樣的樣品要求?(1)樣品純度要求:OD值應在1.8至2.2之間;電泳檢測28S:18S至少大于1.8。(2)樣品濃度:totalRNA濃度不低于400ng/μg。(3)totalRNA樣品請置于-20℃保存;請提供totalRNA樣品具體濃度、體積、制備時間、溶劑名稱及物種來源。請同時附上QC數據,包括電泳膠圖、分光光度或Nanodrop儀器檢測數據。(4)樣品請置于1.5ml管中,管上注明樣品名稱、濃度以及制備時間,管口使用Parafilm封口。建議使用干冰運輸,并且盡量選用較快的郵遞方式,以降低運輸過程中樣品降解的可能性。
宏轉錄學組的概念:宏轉錄組是特定時期、環境樣本、組織樣本中所有的微生物的RNA(轉錄本)的匯合。通過對這些轉錄本進行大規模高通量測序,可以直接獲得環境中可培養和不可培養的微生物轉錄組信息。這種技術不只具有宏基因組技術的全部優點,可以檢測環境中的活性微生物、活性轉錄本以及活性功能進行研究,還可以比較不同環境下的差異表達基因和差異功能途徑,揭示微生物在不同環境壓力下的適應機制,探索環境與微生物之間的互作機理。什么是轉錄組學測序?
轉錄組學技術:轉錄組學(transcriptomics),是一門在整體水平上研究細胞中基因轉錄的情況及轉錄調控規律的學科。簡而言之,轉錄組學是從RNA水平研究基因表達的情況。轉錄組即一個活細胞所能轉錄出來的所有RNA的總和,是研究細胞表型和功能的一個重要手段。優勢:高通量、更精確的數字信號;在單核苷酸水平對任意物種的整體轉錄活動進行檢測;分析轉錄本的結構和表達水平的同時,還能發現未知轉錄本和稀有轉錄本;準確地識別可變剪切和融合基因。應用方向:植物生長機制的發現及干預;炎癥發生機制的發現及干預;表達差異的研究;基因點突變及多態性檢測。轉錄組學測序有什么樣的樣品要求?南京circ RNA轉錄組學服務
轉錄組學是從RNA水平研究基因表達的情況。南京mRNA-seq轉錄組學方法
宏轉錄組學也稱為環境轉錄組學,指從整體水平上研究某一特定環境、特定時期菌群群體全部基因轉錄情況以及轉錄調控規律,以揭示微生物在不同環境壓力下的適應機制,探索環境與微生物之間的相互作用機理。其適用范圍包括人體微生態、環境、工業、農業等領域。宏轉錄組學以生態環境中的全部RNA為研究對象,避開了微生物分離培養困難的問題,能有效的擴展微生物資源的利用空間。應用領域:包括腸道微生物、口腔微生物、糞便微生物、人體組織微生物。南京mRNA-seq轉錄組學方法
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