泛素化修飾蛋白質組學的作用:泛素化、心血管等疾病的發病密切相關。因此,作為近年來生物化學研究的一個重大成果,它已然成為研究、開發新藥物的新靶點。技術原理是首先將蛋白樣本酶解成肽段混合物,然后使用液相色譜對酶解后的肽段混合物進行組分分離以降低樣本復雜程度,然后通過高質量的泛素化修飾抗體和生物材料對修飾肽段進行富集,之后上樣至液相色譜-串聯質譜中進行分析定量。技術優勢:高特異性的修飾抗體;高分辨率、高靈敏度質譜儀;鑒定通量高;可與代謝組學等進行多組學聯合分析。泛素化修飾蛋白組學是一種重要的翻譯后修飾。武漢蛋白質琥珀酰化修飾組學質譜分析
定量N-糖基化蛋白質翻譯修飾組學:蛋白質的N-糖基化位點修飾是重要的蛋白質翻譯后修飾之一,主要在復雜的多細胞或組織形成過程中起關鍵作用。蛋白質的N-糖基化修飾位點具有保守的氨基酸序列NX(S/T)(其中X為除脯氨酸以外的其它氨基酸)凝集素親和法是目前糖蛋白質組學中應用普遍的分離富集方法。凝集素(lectin)是一類糖結合蛋白質,能專一識別某一特殊結構的單糖或聚糖中特定的糖基序列而與之結合,它們與糖鏈可逆非共價結合,糖蛋白或糖肽被凝集素捕獲之后,通常用特定的單糖通過競爭結合凝集素將糖蛋白或糖肽洗脫下來。貴州丙酰化修飾蛋白質組學分析研究乙酰化修飾蛋白組學應用方向有什么?
乙酰化修飾蛋白組學應用方向:1、乙酰化修飾與細胞基因表達調控、表觀調控、細胞凋亡、細胞代謝、信號轉導、蛋白質穩定性等生理過程研究。2、乙酰化引起的代謝疾病、代謝紊亂發生等疾病機理研究。乙酰化生物學意義:1、調節DNA-蛋白、蛋白-蛋白相互作用;2、與其他PTMs發生crosstalk;3、調節酶活性;4、調控蛋白亞細胞定位。生物領域各個研究方面,如:1、農林領域:抗逆脅迫機制,生長發育機制,育種保護研究等;2、 畜牧業:肉類及乳品質研究,致病機理研究等。
蛋白翻譯后修飾位點鑒定:蛋白質翻譯后修飾(Post-Translational Modifications, PTMs)幾乎參與了細胞所有正常生命活動的過程,并發揮十分重要的調控作用。蛋白質修飾位點能夠影響蛋白的多種屬性,包括蛋白質折疊、活性以及之后的功能,對于蛋白質修飾位點的發現及研究對闡明蛋白質的功能具有重要作用。技術特點:時間快,周期短;識別位點準確,采用高分辨率質譜技術可以準確定位到發生修飾的氨基酸位點。適用范圍:已知蛋白序列;明確翻譯后修飾的類型。蛋白質翻譯后修飾是影響蛋白質功能并調節整個細胞過程的重要方式。
磷酸化修飾蛋白質組學服務:蛋白質的磷酸化修飾是生物體內重要的共價修飾方式之一。磷酸化修飾本身所具有的簡單、靈活、可逆的特性,以及磷酸基團的供體ATP的易得性,使得磷酸化修飾被真核細胞所選擇接受成為一種比較普遍的調控手段。蛋白質的磷酸化和去磷酸化這一可逆過程,幾乎調節著包括細胞的增殖、發育、分化、細胞骨架調控、細胞凋亡、神經活動、肌肉收縮、新陳代謝發生等生命活動的所有過程,并且可逆的蛋白質磷酸化是目前所知道的比較主要的信號轉導方式。目前已經知道有許多人類疾病是由于異常的磷酸化修飾所引起,而有些磷酸化修飾卻是某種疾病所導致的后果。蛋白質的翻譯后修飾過程極其復雜。貴陽丙二酰化修飾蛋白質組學質譜分析
蛋白質磷酸化修飾組學是植物體內比較常見的PTM修飾手段。武漢蛋白質琥珀酰化修飾組學質譜分析
泛素化修飾蛋白組學研究:泛素化修飾蛋白組學是一種重要的翻譯后修飾。泛素-蛋白酶體系統介導了真核生物體內80%~85%的蛋白質降解。此外,泛素化修飾還可以直接影響蛋白質的活性和定位,調控包括細胞周期、細胞凋亡、轉錄調控、DNA 損傷修復以及免疫應答等在內的多種細胞活動。由于翻譯后修飾的蛋白質在生物樣本中含量低、動態范圍廣,質譜分析前需要對修飾進行富集以提高其豐度,然后利用傳統的定量蛋白組分析手段對富集得到的泛素化肽段樣品進行定量分析。武漢蛋白質琥珀酰化修飾組學質譜分析