什么是轉錄組學測序？轉錄組廣義上指在某一生理條件下，細胞內所有轉錄組產物的組合，包括：mRNA、ncRNA、rRNA等；狹義上指所有mRNA的組合。轉錄組測序的研究對象為特定細胞在某一功能狀態下所能轉錄出來的所有RNA的總和，主要包括mRNA和ncRNA。轉錄組具有時間特異性、組織特異性、空間特異性等特點。無參轉錄組和有參轉錄組的區別？如果所研究的物種有組裝注釋質量較好基因組序列，且和該基因組序列比對效率較高，那么可以采用有參轉錄組的分析策略，直接進行分析。反之，則需要按照無參轉錄組的分析策略進行轉錄本組裝，構建unigene庫，然后進行后續分析。circRNA主要存在于細胞質或外泌體中，具有組織特異性、疾病特異性、時序特異性及高穩定性等特征。南京全長轉錄學組方法

轉錄組是特定發育階段或生理條件下細胞內的完整轉錄信息的匯合，表示了基因表達的中間狀態。轉錄組測序可以對所有轉錄物進行分類、確定基因的轉錄結構、量化轉錄物的表達水平。蛋白質是生命功能的直接執行者，蛋白組是一種細胞乃至一種生物所表達的全部蛋白質。整合轉錄組學和蛋白質組學的表達數據對生物樣本進行研究，可以從整體上解釋生物學問題，探究生物體生理和疾病機理等。轉錄組學應用于胃腸瘤發生機制研究：利用轉錄組學可檢測瘤細胞惡化過程中的RNA（編碼RNA及非編碼RNA）的變化，有助于更好地理解胃腸瘤的發生機制。武漢轉錄組學鑒定轉錄組學測序樣品純度要求，電泳檢測28S:18S至少大于1.8。

宏轉錄組分析：從以G為單位的高通量測序數據中獲取研究所需的微生物種類、基因、通路等信息是進行宏轉錄組研究必須經歷的一步。現在網絡上分析組學數據的工具五花八門。能否從眾多組學工具中選擇出適合分析宏轉錄組數據的軟件，能否搭建一套完整、快速、高效、靈敏、高精確的宏轉錄組分析pipline，直接關乎到后期數據分析的進行。這種技術不只具有宏基因組技術的全部優點，可以檢測環境中的活性微生物、活性轉錄本以及活性功能進行研究，還可以比較不同環境下的差異表達基因和差異功能途徑，揭示微生物在不同環境壓力下的適應機制，探索環境與微生物之間的互作機理。

轉錄組學測序比其他研究方法有哪些優勢?（1）可以直接測定每個轉錄本片段序列、單核苷酸分辨率的準確度，同時不存在傳統微陣列雜交的熒光模擬信號帶來的交叉反應和背景噪音問題；（2）靈敏度高，可以檢測細胞中少至幾個拷貝的稀有轉錄本；（3）可以對任意物種進行全基因組分析，無需預先設計特異性探針，因此無需了解物種基因信息，能夠直接對任何物種進行轉錄組分析，同時能夠檢測未知基因，發現新的轉錄本，并準確地識別可變剪切位點及cSNP，UTR區域。轉錄組即一個活細胞所能轉錄出來的所有RNA的總和，是研究細胞表型和功能的一個重要手段。

轉錄組測序推薦的測序數據量？轉錄組測序所需數據量與所研究物種的基因組大小有關，基因組越大，則所需數據量越大。按照我們的經驗來說：常規物種一般建議6G數據即可；基因組較大的物種推薦8G以上數據，比如：小麥建議10G數據起，甘蔗、甘薯建議至少8G數據。轉錄組測序必須做生物學重復么？需要幾個重復？生物學重復是生物實驗所必須的，轉錄組測序也不例外，至少3 次生物學重復。準備生物重復樣品時，通過對實驗的預先設計和控制，盡可能將與實驗處理無關的背景條件控制在同一水平，減少批次效應對結果的影響。轉錄學組測序可對任意物種的整體轉錄活動進行檢測。廣東全長轉錄學組服務

轉錄組學是研究細胞表型和功能的一個重要手段。南京全長轉錄學組方法

單細胞RNA-seq轉錄組學工作流程：單細胞RNA測序等高通量單細胞轉錄組學技術通常從針對不同瘤和組織類型（解離、分選和分離細胞等）量身定制的實驗工作流程開始，然后產生可以比對的序列，量化、質量控制(QC)過濾和以不同方式標準化，以實現許多下游計算分析，例如聚類分析以識別轉錄不同的細胞類型和亞群，等位基因分析以識別單核苷酸變異（SNV，用星號表示）或拷貝數變體（CNV）、軌跡分析、剪接檢測或瘤的微環境（TME）相互作用的推斷中。單細胞轉錄組學數據的分析通常因精心設計的研究設計而變得復雜，這些設計可能包括來自患病和未患病個體的樣本、在不同時間點（例如，診療前和診療后）收集的同一個人的多個樣本，或來自表現出不同疾病狀態的不同個體的多個樣本。這樣的研究設計可以發現患者共享的轉錄特征，這些特征可能定義疾病中常見的干擾分子途徑。南京全長轉錄學組方法