免疫組化可以輔助病理診斷、指導、評估預后，所以在做免疫組化過程中的質控問題處理尤其重要。免疫組化技術是利用已知的特異性抗體或抗原特異性結合的特點，通過化學反應使標記于結合后的特異性抗體上的顯示劑通過借助顯微鏡的觀察，從而在抗原抗體結合部位確定組織細胞結構的一門組化技術。在病理診斷、基礎醫學研究工作中免疫組化技術已成為非常重要的手段。隨著免疫組化試劑新種類不斷出現及方法的改進，特別是即用型試劑盒的出現，使抗體的標記更加簡便、快捷，更加規范化，標準化的實驗操作是必不可少的。免疫組化標準化染色技術是一項實驗性很強的技術，任何一個環節出現問題，都可以直接影響免疫組化結果免疫組化切片 不掉片，厚薄均勻哪里好找上海融享生物。江蘇特殊染色免疫組化檢測電話
基本原理編輯
抗體和抗原之間的結合具有高度的特異性，免疫組織化學正是利用了這一原理。先將組織或細胞中的某種化學物質提取出來，以此作為抗原或半抗原，通過免疫動物后獲得特異性的抗體，再以此抗體去探測組織或細胞中的同類的抗原物質。由于抗原與抗體的復合物是無色的，因此還必須借助于組織化學的方法將抗原抗體結合的部位顯示出來，以期達到對組織或細胞中的未知抗原進行定性，定位或定量的研究。分類編輯
免疫組織化學技術按照標記物的種類可分為免疫熒光法、免疫酶法、免疫鐵蛋白法、免疫金法及放射免疫自顯影法等。
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——90年代分子雜交技術、原位雜交技術、免疫細胞化學分類方法迅速發展。——2000年各種免疫組化技術更加成熟，使免疫組化技術成為當今生物醫學中形態、功能代謝綜合研究的一項有力工具。其應用范圍深達醫學各個學科，是目前生命科學工作者應該掌握的基本技術之一。免疫組化技術技術分類（1）根據染色方式分成：①貼片染色②漂浮染色（2）根據Ag—Ab結合方式分成：①直接法②間接法③多層法（3）按標記物的性質分成：①免疫熒光技術（免疫熒光法）②免疫酶技術（酶標抗體法、橋法、PAD法、ABC法）③免疫金屬技術（免疫鐵蛋白法、免疫金染色法、蛋白A金法）免疫組化技術標記物（1）必要性：組織細胞內Ag—Ab結合反應一般是不可見的，若在鏡下檢測，則必須具有可視性標記物。（2）常用標記物①熒光素：較常用的是異硫一氰酸熒光素（Fluoresceinisothiocyanate，FITC）——熒光顯微鏡下呈綠色熒光四乙基羅達明（rho—damineRB200）——熒光顯微鏡下發橙紅色熒光②酶：辣根過氧化物酶、堿性磷酸酶。③生物素：（Biotin）④鐵蛋白金等：主要應用于免疫電鏡。其他：如同位素（因涉及污染和防護難一般不用）免疫組化技術應用凡是組織細胞內具有抗原性的物質。
色反應的控制 免疫酶染色應注意控制：①成色質濃度和溫育時間可調節 ，增加成色質的量和/或增加底物溫育時間，可增加反應產物強度。著色太深可減少溫育反應時間。②過氧化物酶顯色時，H2O2較大濃度將使顯色反應過快而致背景加深；過量H2O2可能88酶的活性。
4．復染 根據所用的染色方法和呈顯顏色等，可選用適當的復染方法。如陽性結果呈紅或棕色，則用蘇木素將細胞核染成蘭色，以便定位檢測。也可用1%～2%甲基綠復染。
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根據標記物的不同，免疫細胞化學技術可分為免疫熒光細胞化學技術，免疫酶細胞化學技術，免疫鐵蛋白技術，免疫金-銀細胞化學技術，親和免疫細胞化學技術，免疫電子顯微鏡技術等。近些年來，核酸分子原位雜交技術采用生物素、地高辛等非放射性物質標記探針，和免疫細胞化學技術密切結合，發展為雜交免疫細胞化學技術。不同的免疫細胞化學技術，各具有獨特的試劑和方法，但其基本技術方法是相似的，都包括抗休的制備，組織材料的處理、免疫染色、對照試驗、顯微鏡觀察等步驟。還有雙重和多重標記技術也有重要的用途。上海融享生物免疫朱短周期，服務優。浙江免疫組化公司電話
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減少或消除非特異性染色的方法 組織中非抗原抗體反應出現的陽性染色稱為非特異性背景染色，較好常見的原因是蛋白吸附于高電荷的膠元和結締組織成分上。有效方法是在用首先抗體前加制備第二抗體動物之非免疫血清（1：5-1：20）封閉組織上帶電荷基團而除去與首先抗體非特異性結合。必要時可加入2%-5%牛血清白蛋白，可進一步減少非特異性染色。作用時間為10-20min。也可用除制備首先抗體以外的其它動物血清（非免疫的）。有明顯溶血的血清不能用，以免產生非特異性染色。免疫熒光染色時，可用0.01%伊文氏蘭(PBS溶液)稀釋熒光抗體,對消除背景的非特異性熒光染色有很好的效果。當然使用特異性高、效價高的首先抗體是較好重要的條件。洗滌用的緩沖液中加入0.85%~1%NaCl成為高鹽溶液,充分洗滌切片,能有效的減少非特異性結合而減少背景染色。江蘇特殊染色免疫組化檢測電話